7次低速離心，總耗時~100分鐘（含60分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（可選用50k MWCO型號）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min，置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。上海超濾濃縮管代理銷售電話多少？嘉定區(qū)默克2ml超濾濃縮管代理價格

高通量超濾 MultiScreen?超濾膜板 MultiScreen? 超濾膜板是實現(xiàn)高通量生物樣品處理的必備工具，能配合自動化工作平臺對樣品進行純化、濃縮、脫鹽或分析前去除蛋白等操作。Millipore 提 供 3 種帶有低吸附超濾膜的 96 孔板，在高通量操作時樣品吸附損失小而得率高。 優(yōu)點與應(yīng)用： 高通量：96 孔超濾膜板和 384 孔膜板 可靠：低蛋白吸附，蛋白得率高，孔間數(shù)據(jù)均一性好 功能多樣：樣品體積 50-500μL 適用，兼容各種 96/384 孔板標(biāo)準(zhǔn)操作設(shè)備或自動化平臺 用于高通量蛋白鑒定與篩選的濃縮、脫鹽，以及樣品分析前大分子蛋白去除 也可用于核酸（DNA/RNA/PCR 產(chǎn)物 / ***）樣品制備及二代測序樣品制備嘉定區(qū)默克2ml超濾濃縮管代理價格上海超濾濃縮管銷售公司。

濃度：當(dāng)需要截留的樣品濃度很低時，通量通常不受濃度影響。操作過 程中，隨著溶質(zhì)濃度的升高，增加的粘滯性和極化將導(dǎo)致通量降低。 溫度：粗體，作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時的溫度可 以提高超濾效率。每增加 1℃蛋白擴散率增加 3-3.5%，同時溶液粘度降低。 實踐中一般是以樣品和設(shè)備能耐受的比較高溫度來操作。 pH：改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結(jié)構(gòu)，蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會沉淀，產(chǎn)生堵塞和得率損失。 污垢：溶液中除了目的分子造成的濃差極化，還有其它小顆粒和分子會 在膜上富集和沉淀，逐漸堆積在膜孔上或膜孔結(jié)構(gòu)中，形成結(jié)晶和沉淀。

提供的超濾管是沒有經(jīng)過去內(nèi)***處理的，同時由于內(nèi)***通常以多聚體的形式存在，大小 在10-1000KD之間不等，在超濾的過程中是無法去除的。可在實驗前通過先用0.5M NaOH預(yù)清洗，隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內(nèi)***。關(guān)于針對Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內(nèi)***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜，這種材質(zhì)是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白，它們和膜的非特異吸附可能會增強，對于這種情況，可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra 0.5或2來進行實驗，通過減小膜面積來降低非特異性吸附。根據(jù)您的具體需求選擇不同的超濾濃縮管設(shè)計。

Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag，His?Tag等重組表達(dá)蛋白及抗體，適合～0.5 mL裂解液操作 6次低速離心，總耗時~100分鐘（含65分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動物實驗前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進行細(xì)胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應(yīng)該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]您了解超濾濃縮管的優(yōu)勢嗎？楊浦區(qū)Millipore超濾濃縮管咨詢報價

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特別推薦應(yīng)用（提供實驗報告作為參考） Microcon?超濾管： Microcon?PCR 級超濾管： ? 法醫(yī)鑒定分析的DNA樣品制備 ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 體外合成mRNA的純化 ? 以人mRNA或總RNA制備熒光DNA探針 ? 游離標(biāo)記物的去除 ? 納克級核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 ? 替代乙醇沉淀，離心法高效濃縮基因組DNA 應(yīng)用指南 典型應(yīng)用 肽及生長因子濃縮 蛋白濃縮與脫鹽 電泳等操作前的蛋白樣品濃縮 HPLC前去除蛋白 組織培養(yǎng)抽提物和細(xì)胞裂解液中大分子成分的純化 生物樣本濃縮（抗原，抗體，酶等） 從含有SDS（或無SDS）的緩沖液中濃縮gDNA 核酸濃縮與脫鹽（單鏈或雙鏈核酸） 去除標(biāo)記核苷酸 去除標(biāo)記氨基酸 從擴增的DNA產(chǎn)物中去除引物 克隆前去除連接序列（linker）嘉定區(qū)默克2ml超濾濃縮管代理價格

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