這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應用兼容,常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進行緩沖液置換。傳統透析方法需要時間很長,多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活,而且***還需要一步濃縮。新產品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新,需一步溫和的滲濾操作即可達到同時對樣品進行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標準 操作步驟的優化與簡化往往帶來更好的結果,數據的穩定性、可比性和高通量化隨之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體,減少樣品轉移損失和人為操作的繁瑣和誤差,使蛋白樣品的處理更加標準化,數據結果便于評估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。上海超濾濃縮管代理銷售哪家比較好?奉賢區濃縮管代理價
Minicon?濃縮器 Minicon? 濃縮器用于在電泳或免疫電泳分析前對尿液和腦脊液進行濃縮,以增強對不正常或病態的蛋白質(例如尿中的 Bence Jones 蛋白)的識別。B15型有 8 個濃縮單元,用于 5mL 樣本的處理;CS15型有 10 個濃縮單元,適合 2.5mL 樣品的處理。溶劑和鹽分通過超濾被吸收劑吸收而樣品被濃縮。 優點與應用 靜態濃縮器,不需要其它輔助裝置 濃縮倍數達到 100 倍,樣品終體積小 同時濃縮多個臨床樣品 特別推薦用于尿液、腦脊液等的蛋白 富集分析崇明區默克超濾濃縮管代理價格上海Millipore超濾濃縮管授權代理商!
抗體標記 適合25-200μg樣品操作 5次低速離心,總耗時~50分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 加入抗體樣品 ? 對于比較稀釋的樣品(< 1 mg/mL) - 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(建議使用50k MWCO)。 - 加上至多1 mL抗體樣品, 4,000×g離心15 min。 ? 對于濃度較高的的樣品(≥ 1 mg/mL) - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(建議使用50k MWCO)中加入至多100μL樣品。 - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(建議使用50k MWCO)中加入至多100μL樣品。 大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內濃縮至350μL;死體積設計確保樣品不會被離干而損失。
7次低速離心,總耗時~100分鐘(含60分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(可選用50k MWCO型號)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。超濾濃縮管代理銷售哪家比較靠譜。
Amicon? Ultra超濾管的膜材質為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產工藝嚴格,截留分子量明確而精細,蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少? 按照經驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數量級(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關的測試,所以無法提供更進一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設計,不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q?超純水洗滌除去。您知道益啟生物公司的超濾濃縮管系列都有哪些嗎?浦東新區超濾濃縮管
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濃度:當需要截留的樣品濃度很低時,通量通常不受濃度影響。操作過 程中,隨著溶質濃度的升高,增加的粘滯性和極化將導致通量降低。 溫度:粗體,作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時的溫度可 以提高超濾效率。每增加 1℃蛋白擴散率增加 3-3.5%,同時溶液粘度降低。 實踐中一般是以樣品和設備能耐受的比較高溫度來操作。 pH:改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結構,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會沉淀,產生堵塞和得率損失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的濃差極化,還有其它小顆粒和分子會 在膜上富集和沉淀,逐漸堆積在膜孔上或膜孔結構中,形成結晶和沉淀。奉賢區濃縮管代理價
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