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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023年06月18日

用超濾對(duì)分子進(jìn)行分級(jí) 通過(guò)選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實(shí)際。事實(shí)上,膜的規(guī)格描述是基于截留而非通過(guò) 的性質(zhì)。一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中,采用 100k NMWL 濾膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但這時(shí)比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過(guò)濾膜, 75kDa 的分子截留率為 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 種成分通過(guò)膜并不像單一成分的溶液那么簡(jiǎn)單和容易。實(shí) 踐中,如果要分離兩種大分子,它們之間的分子量差異應(yīng)該達(dá)到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 規(guī)格在兩種蛋白之間,則可達(dá)到比較理想的 分離。如果蛋白溶液較為稀釋?zhuān)蛪合虏僮饕灿兄谶_(dá)到更好的效果。一個(gè)好的超濾濃縮管代理銷(xiāo)售需要具備哪些特點(diǎn)您知道嗎?虹口區(qū)默克2ml超濾濃縮管報(bào)價(jià)

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高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使用的離心管,可以用于2-15mL生物樣品的純化、濃縮、脫鹽等過(guò)濾應(yīng)用。這種離心超濾管流速很快,設(shè)計(jì)緊湊,螺旋蓋使用起來(lái)非常方便,過(guò)濾收集管內(nèi)置低吸附的Ultracel?再生纖維素膜,裝有氣密蓋。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用 特有的反向流操作模式,較大的死體積 采用Ultracel?膜,用于濃縮和純化富含顆粒物 的高濃度樣品,樣品回收率>90% 配合標(biāo)準(zhǔn)的50mL離心管吊籃式轉(zhuǎn)子使用 從發(fā)酵培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞裂解液中分 離低分子量溶質(zhì)寶山區(qū)默克2ml超濾濃縮管聯(lián)系人超濾濃縮管的好處您了解多少呢?

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蛋白親和純化(無(wú)需換液和濃縮) * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時(shí)間等需要略加優(yōu)化。 3次低速離心,總耗時(shí)~75分鐘(含60分鐘孵育時(shí)間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹(shù)脂(沉降的柱床體積)和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹(shù)脂。(柱床)樹(shù)脂量≥ 500μL時(shí)采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h*,其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。

離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱(chēng)為“滲濾”,操作時(shí)樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時(shí),原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時(shí)很多樣而復(fù)雜,過(guò)濾的過(guò)程中很重要的一點(diǎn)是操作過(guò)程不應(yīng)給樣品帶來(lái)新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請(qǐng)參考產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)或垂詢(xún)技術(shù)支持專(zhuān)線(xiàn) 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì),但膜的很多特性會(huì)對(duì)這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標(biāo)稱(chēng)分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量超濾濃縮管和其他的空壓機(jī)有什么區(qū)別呢?

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特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn) 溫和的磁力攪拌避免發(fā)生聚集和剪切變性 所有型號(hào)都可以高壓滅菌 提供 3 種規(guī)格共選擇,用于濃縮 3mL - 400mL 及更大體積樣品 濃度達(dá) 10% 的溶液依然可以獲得高流速 應(yīng)用: 大分子(如蛋白、酶、抗體和***)溶液的濃縮和緩沖液置換 滲濾(Diafiltration)模式 非連續(xù)滲濾是換液的一種操作方法,即先濃縮到一定濃度再稀釋到起始的體積,并多次重復(fù)這個(gè)操作,直到溶液中的鹽或溶劑被 去除或降到需要的濃度。而連續(xù)滲濾(保持恒定體積)是將超濾杯經(jīng)轉(zhuǎn)換裝置(目錄號(hào)6003)與補(bǔ)液杯(目錄號(hào)6028)連接, 使供氣壓和液體流轉(zhuǎn)。連接有轉(zhuǎn)換裝置時(shí),不必停下系統(tǒng)的運(yùn)轉(zhuǎn)就可以即時(shí)進(jìn)行濃縮和滲濾之間的切換,將兩種操作模式的優(yōu)點(diǎn) 集中在一起,有利于敏感的(蛋白)樣品在**恒定、溫和的條件下高效換液。您了解超濾濃縮管的優(yōu)勢(shì)嗎?青浦區(qū)Merck超濾濃縮管

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無(wú)血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細(xì)胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據(jù)樣品的粘稠程度,以及需要制備的目標(biāo)外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來(lái)選擇和優(yōu)化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa),以便達(dá)到更好的得率和操作體驗(yàn)。 樣品體積大于 30mL 時(shí)可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管,請(qǐng)注意攪拌式超濾杯在200mL 以?xún)?nèi)時(shí)吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進(jìn)一步提高特定外泌體的純度,可選用包被相應(yīng)抗體的磁珠進(jìn)行親和純化精制。虹口區(qū)默克2ml超濾濃縮管報(bào)價(jià)

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