加入漂洗緩沖液（體積是樹脂柱床體積的7.5倍）并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液（體積是樹脂柱床體積的5倍）與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體，在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時，可以延長結合反應時間，并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。上海超濾濃縮管供應商。常州默克超濾濃縮管訂購

提供的超濾管是沒有經過去內***處理的，同時由于內***通常以多聚體的形式存在，大小 在10-1000KD之間不等，在超濾的過程中是無法去除的。可在實驗前通過先用0.5M NaOH預清洗，隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內***。關于針對Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜，這種材質是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白，它們和膜的非特異吸附可能會增強，對于這種情況，可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra 0.5或2來進行實驗，通過減小膜面積來降低非特異性吸附。松江區Merck超濾濃縮管訂購上海超濾濃縮管代理銷售哪家比較好？

加入漂洗緩沖液（體積是樹脂柱床體積的7.5倍）并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液（體積是樹脂柱床體積的5倍）與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體，在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時，可以延長結合反應時間，并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。

Amicon? Ultra 4 mL 超濾管 -離心速度快而保持很高的回收率 4 種不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon? Ultra 4mL 超濾管中濃縮（3kDa 細胞色素 C， 10kDa 細胞色素 C，30kDa BSA，100kDa IgG）， 測定在離心一定時間后的回收率。數據顯 示所有樣品在離心 15 分鐘左右回收率均 >95%。 為了方便初次使用者選擇**合適的超 濾管產品，默克密理博生命科學部網 站上提供選擇指引，您需要按照提 示進行選擇，**終會選出一款產品。 為每次實驗選擇**合適的， 您也能快速成為超濾高手！超濾濃縮管的系列有很多。

用超濾對分子進行分級 通過選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實際。事實上，膜的規格描述是基于截留而非通過 的性質。一項實驗中，采用 100k NMWL 濾膜，大于 100kDa 的分子截 留率 >90%，但這時比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過濾膜， 75kDa 的分子截留率為 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 種成分通過膜并不像單一成分的溶液那么簡單和容易。實 踐中，如果要分離兩種大分子，它們之間的分子量差異應該達到 10 倍 以上，或至少膜的 NMWL 規格在兩種蛋白之間，則可達到比較理想的 分離。如果蛋白溶液較為稀釋，低壓下操作也有助于達到更好的效果。一個好的超濾濃縮管代理銷售需要具備哪些特點您了解嗎？松江區Merck超濾濃縮管訂購

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膜的吸附損失 對于濃度很低及珍貴的樣品，除了考慮截留效率和操作方便外，額外 要關注的是采用的超濾膜及設備對目標蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質對生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對生物分子吸附**小，是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產品成為優先的**技術關鍵之一。濾膜和裝置表面對溶質的 吸附對樣品收率會產生直接影響，所以如果希望盡可能提高得率，就 應該考慮采用較小的設備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應該選 用膜面積小的裝置，同時保證一定的流速。默克密理博設計了一系列 離心式或攪拌式裝置，配合不同的膜面積、不同的截留分子量的切向 流系統，支持您獲得理想的處理效果。常州默克超濾濃縮管訂購

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