外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標準,相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題,真是惠而不費,不亦樂乎?根據(jù)您的具體需求選擇不同的超濾濃縮管設(shè)計。崇明區(qū)默克離心濃縮管一級代理
經(jīng)典離心濃縮裝置 Amicon? Ultra 離心超濾管 反轉(zhuǎn)離心回收 ?反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計使蛋白樣品,特別是小體積樣品高效 回收,避免***頭吸取造成的樣品丟失或操作錯誤 ?0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設(shè)計為反轉(zhuǎn)回收模式 樣品吸附損失小 ?Ultracel? 超濾膜為密理博超濾產(chǎn)品特有的設(shè) 計,非特異吸附比較低,減少樣品的吸附損失 ?膜和聚丙烯管都是低吸附材質(zhì),保證> 90% 回收率 ?豎膜切向流設(shè)計,不像橫膜那樣容易堵,樣品 損失少 ?濃縮速度超快,**少需 10 分鐘普陀區(qū)超濾濃縮管哪家優(yōu)惠您知道益啟生物公司的超濾濃縮管系列都有哪些嗎?
將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內(nèi)加入預(yù)先準備好的1.5 mL含有染料的反應(yīng)混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優(yōu)化選做:將樣品在室溫下多孵育30 min。 6. 上樣池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g離心15 min換液同時濃縮。 8. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管1,000×g離心回收標記好的抗體。 特點與優(yōu)點: 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計,滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設(shè)計的死體積防止離干,保證樣品回收率和活性
操作模式 常規(guī)與切向流 : 常規(guī)溶液過濾(NFF)中液體在壓力或真空驅(qū)動下直接流 過膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上,小分子則通過膜流出。NFF 常 用于無菌過濾、澄清預(yù)過濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過濾(TFF) 液體流過時與膜表面呈一定角度,被膜阻擋的大顆粒物不會累積在膜表 面,而且還會被切向流從膜表面掃除,因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法,而現(xiàn)在,TFF 技術(shù)被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設(shè)計中,使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。超濾濃縮管的系列有很多種。
高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使用的離心管,可以用于2-15mL生物樣品的純化、濃縮、脫鹽等過濾應(yīng)用。這種離心超濾管流速很快,設(shè)計緊湊,螺旋蓋使用起來非常方便,過濾收集管內(nèi)置低吸附的Ultracel?再生纖維素膜,裝有氣密蓋。 優(yōu)點與應(yīng)用 特有的反向流操作模式,較大的死體積 采用Ultracel?膜,用于濃縮和純化富含顆粒物 的高濃度樣品,樣品回收率>90% 配合標準的50mL離心管吊籃式轉(zhuǎn)子使用 從發(fā)酵培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)基、細胞裂解液中分 離低分子量溶質(zhì)一個好的超濾濃縮管代理銷售需要具備哪些特點您知道嗎?崇明區(qū)默克離心濃縮管一級代理
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超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學性質(zhì)、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會透過,因此在大分子樣品處理中得到了應(yīng)用。膠狀或微粒狀物質(zhì)也能夠被截留。UF膜既可以用于透過樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑,則經(jīng)過膜處理可以達到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠遠大于膜孔徑,膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對于樣品更溫和,沒有發(fā)生容易導(dǎo)致生物大分子失活的相變,而且在濃縮的同時可以完成對溶質(zhì)的除鹽。超濾的應(yīng)用不限于蛋白樣品的操作,也常用于核酸樣品制備,包括分子克隆和質(zhì)粒純化。DNA和RNA樣品起始濃度低至5ng/mL也可以被高效地在數(shù)分鐘內(nèi)被濃縮,回收率達到99%以上。崇明區(qū)默克離心濃縮管一級代理
上海益啟生物科技有限公司在同行業(yè)領(lǐng)域中,一直處在一個不斷銳意進取,不斷制造創(chuàng)新的市場高度,多年以來致力于發(fā)展富有創(chuàng)新價值理念的產(chǎn)品標準,在上海市等地區(qū)的化工中始終保持良好的商業(yè)口碑,成績讓我們喜悅,但不會讓我們止步,殘酷的市場磨煉了我們堅強不屈的意志,和諧溫馨的工作環(huán)境,富有營養(yǎng)的公司土壤滋養(yǎng)著我們不斷開拓創(chuàng)新,勇于進取的無限潛力,益啟供攜手大家一起走向共同輝煌的未來,回首過去,我們不會因為取得了一點點成績而沾沾自喜,相反的是面對競爭越來越激烈的市場氛圍,我們更要明確自己的不足,做好迎接新挑戰(zhàn)的準備,要不畏困難,激流勇進,以一個更嶄新的精神面貌迎接大家,共同走向輝煌回來!