樣品的澄清、過濾和除菌 Ultrafree?-MC和Ultrafree?-CL微濾管 Ultrafree?-MC(0.5mL)和Ultrafree?-CL(2mL)是一次性使用的微濾離心管,可以用于各種水性樣品和在某些溶劑中的樣品除顆粒物、除沉淀的處理。提供兩種體積及多種膜孔徑以及已經經過無菌處理的產品供選擇。Ultrafree?微濾離心管操作簡便、樣品回收率高且重復性很好,是蛋白和核酸樣品處理的理想選擇。 特點與優點 有0.1-5.0μm五種膜孔徑供選擇 采用高回收率的親水Durapore? (PVDF)膜和親水PTFE膜 提供無菌包裝和非無菌包裝形式產品 過濾速度快,數據穩定、重現性好 上樣體積為0.5mL (MC)或2mL (CL) 配合1.5mL離心管固定轉子(MC)或15mL離心管轉子使用 頂蓋顏色標識易于區分膜孔徑益啟生物公司的超濾濃縮管系列有很多。松江區Merck離心濃縮管代理商
膜的吸附損失 對于濃度很低及珍貴的樣品,除了考慮截留效率和操作方便外,額外 要關注的是采用的超濾膜及設備對目標蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質對生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對生物分子吸附**小,是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產品成為優先的**技術關鍵之一。濾膜和裝置表面對溶質的 吸附對樣品收率會產生直接影響,所以如果希望盡可能提高得率,就 應該考慮采用較小的設備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應該選 用膜面積小的裝置,同時保證一定的流速。默克密理博設計了一系列 離心式或攪拌式裝置,配合不同的膜面積、不同的截留分子量的切向 流系統,支持您獲得理想的處理效果。楊浦區Merck離心濃縮管代理價格上海超濾濃縮管代理銷售電話多少?
蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過 20mg/ml。對于對濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白,建議的改進方法是: 1)離心力降為推薦離心力的30%-50% 2)改用截留分子量更大的超濾管(如原本選用10k,此時可以選擇30k) 3)在濃縮過程中取出超濾管,用***頭反復吹吸幾次后再繼續濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現這種情況,請先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應立即使用,如暫時不用,請保持潤濕狀態,避免重新干燥。
7次低速離心,總耗時~100分鐘(含60分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(可選用50k MWCO型號)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。超濾濃縮管的系列有很多。
加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時,可以延長結合反應時間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。益啟生物公司專業致力于超濾濃縮管代理銷售。楊浦區Merck離心濃縮管代理價格
對于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。松江區Merck離心濃縮管代理商
超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學性質、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會透過,因此在大分子樣品處理中得到了應用。膠狀或微粒狀物質也能夠被截留。UF膜既可以用于透過樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑,則經過膜處理可以達到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠遠大于膜孔徑,膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對于樣品更溫和,沒有發生容易導致生物大分子失活的相變,而且在濃縮的同時可以完成對溶質的除鹽。超濾的應用不限于蛋白樣品的操作,也常用于核酸樣品制備,包括分子克隆和質粒純化。DNA和RNA樣品起始濃度低至5ng/mL也可以被高效地在數分鐘內被濃縮,回收率達到99%以上。松江區Merck離心濃縮管代理商
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