外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ，4000g離心 X 10 min。 從超濾管內管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進行緩沖液置換，溫柔吸打樣品數次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *上海超濾濃縮管哪家比較專業。金山區濃縮管參數

加入漂洗緩沖液（體積是樹脂柱床體積的7.5倍）并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液（體積是樹脂柱床體積的5倍）與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體，在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時，可以延長結合反應時間，并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。上海默克2ml超濾濃縮管聯系方式對于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。

***的化學兼容性 ?膜與管壁采用特別的熱封工藝，避免使用膠水 帶來的化學溶出對樣品的污染 ?Ultracel? 超濾膜和聚丙烯管材性能穩定，化學 兼容性好 ?pH3-10 適用 特別推薦應用（提供實驗報告作為參考） Amicon? Ultra 離心超濾管： ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 尿液中蛋白質的濃縮 ? 游離標記物的去除 ? 抗體的快速濃縮 ? 血清多肽生物標志物的純化 ? 雙向電泳蛋白樣品制備 ? 樣品去垢劑的去除 操作更安心 ?設計精巧、緊湊，一體化結構確保不會發生滲漏，即 使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作 ?性能穩定，數據平行性、重現性好，適合精細操作和 高通量操作

蛋白復性，溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理，采用溫和的透析方法可以避免其在過度濃縮時發生沉淀和離心操作剪切力對樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設計的透析管，**提高了樣品透析表面積，在2-5小時內即可完成透析，是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨特優點： 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質，增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會像使用夾子或打結那樣造成樣品滲漏和污染，安全可靠 旋蓋式設計，易于打開和關緊 硬管設計，易于更充分地吸取、移走樣品，即使是μL級樣品加樣方便，功能多樣 ? 采用標準***頭加樣，而非注射器和針頭加樣，減少膜破損的風險提供的浮漂適合在常見的廣口燒杯中使用，方便在透析過程中換液D-Tube? 透析管還可以用于從瓊脂糖或丙烯酰凝膠電洗脫樣品Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽！

截留 截留有時也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應會導致分子量相近 的分子表現非常不同的截留狀態。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強 度改變的情況下傾向于聚集或改變構象，因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多，從而導致排阻增加。比如，有些蛋白質在某些緩沖液條件下 會發生多聚化，而另一些則發生解聚（如血紅素蛋白）成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復雜。以默克密理博的經驗，我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優先，再根據實際情況加以調整。上海超濾濃縮管哪家比較好？金山區默克超濾濃縮管一級代理

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無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據樣品的粘稠程度，以及需要制備的目標外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便達到更好的得率和操作體驗。 樣品體積大于 30mL 時可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管，請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內時吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進一步提高特定外泌體的純度，可選用包被相應抗體的磁珠進行親和純化精制。金山區濃縮管參數

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