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來源: 發(fā)布時間:2023年06月29日

上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優(yōu)化。 用Protein A或G對抗體進(jìn)行親和純化超濾濃縮管應(yīng)用領(lǐng)域你知道嗎。浦東新區(qū)默克離心濃縮管批發(fā)

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這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應(yīng)用兼容,常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進(jìn)行緩沖液置換。傳統(tǒng)透析方法需要時間很長,多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活,而且***還需要一步濃縮。新產(chǎn)品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新,需一步溫和的滲濾操作即可達(dá)到同時對樣品進(jìn)行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標(biāo)準(zhǔn) 操作步驟的優(yōu)化與簡化往往帶來更好的結(jié)果,數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性、可比性和高通量化隨之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創(chuàng)造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體,減少樣品轉(zhuǎn)移損失和人為操作的繁瑣和誤差,使蛋白樣品的處理更加標(biāo)準(zhǔn)化,數(shù)據(jù)結(jié)果便于評估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。普陀區(qū)默克超濾濃縮管報價您知道益啟生物公司的超濾濃縮管系列都有哪些嗎?

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脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心,總耗時~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做:加入1.5 mL用于置換的緩沖液,1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 4. 加入1.5 mL樣品,4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液,4,000×g離心15 min,換液的同時進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進(jìn)行較大體積操作時,可以適當(dāng)延長離心時間,也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細(xì)信息。

外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動物實驗前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動物實驗之前還需進(jìn)行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進(jìn)行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進(jìn)行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *益啟生物公司的超濾濃縮管種類繁多。

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外泌小體(Exosome)是一種囊泡結(jié)構(gòu),直徑通常在30-150nm,常見于正常體液和病理樣本,培養(yǎng)細(xì)胞也可分泌。研究人員已經(jīng)在血液、唾液、尿液、母乳等中發(fā)現(xiàn)外泌小體,其運載的蛋白和核酸涉及其細(xì)胞間物資、信息交流,影響和調(diào)控著多方面的生理功能,包括**的發(fā)生、免疫促進(jìn)、凋亡調(diào)控、血管的生成、炎癥的反應(yīng)及發(fā)育和分化等。由于在體液中出現(xiàn),外泌小體對于臨床生物標(biāo)志物檢測來說特別有利,成為體外診斷、biomarker研究的新熱點。你知道超濾濃縮管的用途嗎?閔行區(qū)超濾濃縮管報價

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默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設(shè)計 一經(jīng)推出即成為生物樣品操作的行業(yè)頭牌產(chǎn)品。不論是蛋白、 核酸、***或顆粒物,抑或低濃度樣品或?qū)氋F的活性樣品, Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn) 化,并滿足下游各種應(yīng)用的要求,使研究者處理樣品時倍感輕 松。 Amicon? Ultra 超濾管的獨特優(yōu)點: 有效濃縮同時保證比較高的蛋白回收率 合理的死體積設(shè)計 ?避免樣品離干而降低回收率 ?便于估計和控制樣品濃縮倍數(shù) ?重復(fù)性好,便于樣品數(shù)據(jù)相互比較浦東新區(qū)默克離心濃縮管批發(fā)

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