外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標準,相較于需要昂貴的設備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題,真是惠而不費,不亦樂乎?超濾濃縮管的系列有很多。寶山區Merck超濾濃縮管聯系電話
近年來隨著分離純化技術的提高,關于外泌小體的研究成果頗豐;這進一步吸引了越來越多領域的課題將外泌體納入研究對象。研究的前提是方便、高效、標準化地分離純化外泌小體。經過近20年的探索,已經建立了超速離心法、沉淀法、色譜法、親和純化法等。在大量實踐中大家逐漸認識到根據下游研究對樣品的要求,以及起始樣品的規模、數量,可以選擇不同的外泌體制備策略。因不需要特殊的設備和試劑盒,對操作人員也沒有特別的經驗要求,超濾法后來居上,成為實驗室中制備外泌體的通用方法。江蘇默克超濾濃縮管哪家好上海超濾濃縮管哪家比較好?
高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使用的離心管,可以用于2-15mL生物樣品的純化、濃縮、脫鹽等過濾應用。這種離心超濾管流速很快,設計緊湊,螺旋蓋使用起來非常方便,過濾收集管內置低吸附的Ultracel?再生纖維素膜,裝有氣密蓋。 優點與應用 特有的反向流操作模式,較大的死體積 采用Ultracel?膜,用于濃縮和純化富含顆粒物 的高濃度樣品,樣品回收率>90% 配合標準的50mL離心管吊籃式轉子使用 從發酵培養基、細胞培養基、細胞裂解液中分 離低分子量溶質
創新的純化 - 濃縮 - 換液一體化系統 Amicon? Pro 純化超濾系統 目前的蛋白純化常常包括很多步驟,用到多種器具,卻又因此帶來蛋白降解和損失的問題。為了避免因樣品轉移帶來的各種風險,減少您在樣品孵育、漂洗、洗脫、濃縮及換液各步上耗費的時間,默克密理博的研發團隊創新地推出了Amicon?Pro一體化純化超濾系統。Amicon?Pro提供了對小量蛋白樣品的標準化操作,使純化濃縮蛋白變得簡便高效,數據穩定易得。 開放的設計使您可以根據實際需要靈活使用,Amicon?Pro將成為實驗室小量蛋白純化、濃縮、換液各種操作的多功能工具。上海Millipore超濾濃縮管授權代理商!
上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規格可選)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優化。 用Protein A或G對抗體進行親和純化超濾濃縮管具體報價多少呢。楊浦區默克超濾濃縮管聯系方式
益啟生物公司的超濾濃縮管種類繁多。寶山區Merck超濾濃縮管聯系電話
加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時,可以延長結合反應時間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。寶山區Merck超濾濃縮管聯系電話
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