近年來隨著分離純化技術的提高，關于外泌小體的研究成果頗豐；這進一步吸引了越來越多領域的課題將外泌體納入研究對象。研究的前提是方便、高效、標準化地分離純化外泌小體。經過近20年的探索，已經建立了超速離心法、沉淀法、色譜法、親和純化法等。在大量實踐中大家逐漸認識到根據下游研究對樣品的要求，以及起始樣品的規模、數量，可以選擇不同的外泌體制備策略。因不需要特殊的設備和試劑盒，對操作人員也沒有特別的經驗要求，超濾法后來居上，成為實驗室中制備外泌體的通用方法。益啟生物公司專業從事超濾濃縮管代理銷售。嘉定區默克15ml超濾濃縮管商家

抗體標記 適合25-200μg樣品操作 5次低速離心，總耗時~50分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 加入抗體樣品 ? 對于比較稀釋的樣品（< 1 mg/mL） - 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）。 - 加上至多1 mL抗體樣品， 4,000×g離心15 min。 ? 對于濃度較高的的樣品（≥ 1 mg/mL） - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）中加入至多100μL樣品。 - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）中加入至多100μL樣品。 大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內濃縮至350μL；死體積設計確保樣品不會被離干而損失。 江蘇Merck超濾濃縮管聯系方式超濾濃縮管和其他的空壓機有什么區別呢？

Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag，His?Tag等重組表達蛋白及抗體，適合～0.5 mL裂解液操作 6次低速離心，總耗時~100分鐘（含65分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]

蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過 20mg/ml。對于對濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白，建議的改進方法是： 1）離心力降為推薦離心力的30%-50% 2）改用截留分子量更大的超濾管（如原本選用10k，此時可以選擇30k） 3）在濃縮過程中取出超濾管，用***頭反復吹吸幾次后再繼續濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現這種情況，請先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應立即使用，如暫時不用，請保持潤濕狀態，避免重新干燥。益啟生物公司作為上海一家專業從事超濾濃縮管代理銷售。

操作模式 常規與切向流 : 常規溶液過濾（NFF）中液體在壓力或真空驅動下直接流 過膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上，小分子則通過膜流出。NFF 常 用于無菌過濾、澄清預過濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過濾（TFF） 液體流過時與膜表面呈一定角度，被膜阻擋的大顆粒物不會累積在膜表 面，而且還會被切向流從膜表面掃除，因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法，而現在，TFF 技術被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設計中，使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。超濾濃縮管的好處您了解多少呢？江蘇Merck超濾濃縮管聯系方式

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這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應用兼容，常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進行緩沖液置換。傳統透析方法需要時間很長，多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活，而且***還需要一步濃縮。新產品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新，需一步溫和的滲濾操作即可達到同時對樣品進行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標準 操作步驟的優化與簡化往往帶來更好的結果，數據的穩定性、可比性和高通量化隨之得以改 善，默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體，減少樣品轉移損失和人為操作的繁瑣和誤差，使蛋白樣品的處理更加標準化，數據結果便于評估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。嘉定區默克15ml超濾濃縮管商家

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