這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應(yīng)用兼容,常常需要用透析或滲濾方法對(duì)蛋白樣品進(jìn)行緩沖液置換。傳統(tǒng)透析方法需要時(shí)間很長(zhǎng),多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活,而且***還需要一步濃縮。新產(chǎn)品 Amicon? Pro 帶來(lái)了突破性的革新,需一步溫和的滲濾操作即可達(dá)到同時(shí)對(duì)樣品進(jìn)行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標(biāo)準(zhǔn) 操作步驟的優(yōu)化與簡(jiǎn)化往往帶來(lái)更好的結(jié)果,數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性、可比性和高通量化隨之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創(chuàng)造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體,減少樣品轉(zhuǎn)移損失和人為操作的繁瑣和誤差,使蛋白樣品的處理更加標(biāo)準(zhǔn)化,數(shù)據(jù)結(jié)果便于評(píng)估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。超濾濃縮管服務(wù)電話是多少呢。無(wú)錫默克離心濃縮管咨詢報(bào)價(jià)
如果能確保用同樣的超濾管對(duì)其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個(gè)目的蛋白的原因。有時(shí)蛋白會(huì)因其本身的一些特性(構(gòu)象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級(jí)別的超濾管(如原本選用30k,此時(shí)可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過(guò)液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來(lái)確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請(qǐng)參考上面的關(guān)于蛋白沉淀問(wèn)題的解釋。寶山區(qū)默克15ml超濾濃縮管一級(jí)代理買(mǎi)超濾濃縮管找益啟生物公司。
***的化學(xué)兼容性 ?膜與管壁采用特別的熱封工藝,避免使用膠水 帶來(lái)的化學(xué)溶出對(duì)樣品的污染 ?Ultracel? 超濾膜和聚丙烯管材性能穩(wěn)定,化學(xué) 兼容性好 ?pH3-10 適用 特別推薦應(yīng)用(提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告作為參考) Amicon? Ultra 離心超濾管: ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 尿液中蛋白質(zhì)的濃縮 ? 游離標(biāo)記物的去除 ? 抗體的快速濃縮 ? 血清多肽生物標(biāo)志物的純化 ? 雙向電泳蛋白樣品制備 ? 樣品去垢劑的去除 操作更安心 ?設(shè)計(jì)精巧、緊湊,一體化結(jié)構(gòu)確保不會(huì)發(fā)生滲漏,即 使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作 ?性能穩(wěn)定,數(shù)據(jù)平行性、重現(xiàn)性好,適合精細(xì)操作和 高通量操作
Millipore超濾濃縮管設(shè)有反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)使蛋白樣品,特別是小體積樣品回收,避免吸頭吸取造成的樣品丟失或操作錯(cuò)誤; 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設(shè)計(jì)為反轉(zhuǎn)回收模式樣品吸附損失小; 合理的死體積設(shè)計(jì),避免樣品離干而降低回收率; 能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn)化,并滿足下游各種應(yīng)用的要求,使研究者處理樣品時(shí)倍感輕松。 有效濃縮同時(shí)保證高的蛋白回收率 設(shè)計(jì)精巧、緊湊,一體化結(jié)構(gòu)確保不會(huì)發(fā)生滲漏,即使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作。超濾濃縮管的系列有很多。
脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心,總耗時(shí)~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做:加入1.5 mL用于置換的緩沖液,1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 4. 加入1.5 mL樣品,4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液,4,000×g離心15 min,換液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間,也可參考Amicon? Pro完整操作說(shuō)明書(shū) 查看詳細(xì)信息。你知道超濾濃縮管的用途嗎?閔行區(qū)Merck超濾濃縮管聯(lián)系電話
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離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時(shí)樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時(shí),原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時(shí)很多樣而復(fù)雜,過(guò)濾的過(guò)程中很重要的一點(diǎn)是操作過(guò)程不應(yīng)給樣品帶來(lái)新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請(qǐng)參考產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)或垂詢技術(shù)支持專線 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì),但膜的很多特性會(huì)對(duì)這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標(biāo)稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量無(wú)錫默克離心濃縮管咨詢報(bào)價(jià)
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