Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]益啟生物公司專業從事超濾濃縮管代理銷售。金山區Millipore超濾濃縮管聯系方式
樣品的澄清、過濾和除菌 Ultrafree?-MC和Ultrafree?-CL微濾管 Ultrafree?-MC(0.5mL)和Ultrafree?-CL(2mL)是一次性使用的微濾離心管,可以用于各種水性樣品和在某些溶劑中的樣品除顆粒物、除沉淀的處理。提供兩種體積及多種膜孔徑以及已經經過無菌處理的產品供選擇。Ultrafree?微濾離心管操作簡便、樣品回收率高且重復性很好,是蛋白和核酸樣品處理的理想選擇。 特點與優點 有0.1-5.0μm五種膜孔徑供選擇 采用高回收率的親水Durapore? (PVDF)膜和親水PTFE膜 提供無菌包裝和非無菌包裝形式產品 過濾速度快,數據穩定、重現性好 上樣體積為0.5mL (MC)或2mL (CL) 配合1.5mL離心管固定轉子(MC)或15mL離心管轉子使用 頂蓋顏色標識易于區分膜孔徑閔行區默克超濾濃縮管超濾濃縮管具體報價多少呢。
首先,Amicon? Ultra超濾管的蛋白比較低起始濃度為25ug/ml。請確保樣本的起始濃度大于這個濃度。其次,如果問題仍然出現,請不要丟棄樣本濾過液以便用于分析可能的原因: 1)如果目的樣本在濾過液中,那么請排查: a)是否選擇了合適截留分子量的超濾管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)? b)使用的離心力是否是在限定范圍內?如果使用的是rpm,請換算成相應的g離心力,具體換算方法請垂詢。 c)離心機**近是否有校準過? d)是否***嘗試這個蛋白?
蛋白親和純化(無需換液和濃縮) * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優化。 3次低速離心,總耗時~75分鐘(含60分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂(沉降的柱床體積)和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。(柱床)樹脂量≥ 500μL時采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*,其間可溫和攪動促進結合。超濾濃縮管零售多少錢呢?
提供的超濾管是沒有經過去內***處理的,同時由于內***通常以多聚體的形式存在,大小 在10-1000KD之間不等,在超濾的過程中是無法去除的。可在實驗前通過先用0.5M NaOH預清洗,隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內***。關于針對Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜,這種材質是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會增強,對于這種情況,可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra 0.5或2來進行實驗,通過減小膜面積來降低非特異性吸附。您知道益啟生物公司的超濾濃縮管系列都有哪些嗎?虹口區默克離心濃縮管咨詢問價
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***的化學兼容性 ?膜與管壁采用特別的熱封工藝,避免使用膠水 帶來的化學溶出對樣品的污染 ?Ultracel? 超濾膜和聚丙烯管材性能穩定,化學 兼容性好 ?pH3-10 適用 特別推薦應用(提供實驗報告作為參考) Amicon? Ultra 離心超濾管: ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 尿液中蛋白質的濃縮 ? 游離標記物的去除 ? 抗體的快速濃縮 ? 血清多肽生物標志物的純化 ? 雙向電泳蛋白樣品制備 ? 樣品去垢劑的去除 操作更安心 ?設計精巧、緊湊,一體化結構確保不會發生滲漏,即 使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作 ?性能穩定,數據平行性、重現性好,適合精細操作和 高通量操作金山區Millipore超濾濃縮管聯系方式
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