特點與優點 溫和的磁力攪拌避免發生聚集和剪切變性 所有型號都可以高壓滅菌 提供 3 種規格共選擇,用于濃縮 3mL - 400mL 及更大體積樣品 濃度達 10% 的溶液依然可以獲得高流速 應用: 大分子(如蛋白、酶、抗體和***)溶液的濃縮和緩沖液置換 滲濾(Diafiltration)模式 非連續滲濾是換液的一種操作方法,即先濃縮到一定濃度再稀釋到起始的體積,并多次重復這個操作,直到溶液中的鹽或溶劑被 去除或降到需要的濃度。而連續滲濾(保持恒定體積)是將超濾杯經轉換裝置(目錄號6003)與補液杯(目錄號6028)連接, 使供氣壓和液體流轉。連接有轉換裝置時,不必停下系統的運轉就可以即時進行濃縮和滲濾之間的切換,將兩種操作模式的優點 集中在一起,有利于敏感的(蛋白)樣品在**恒定、溫和的條件下高效換液。超濾濃縮管應用領域你知道嗎。金山區默克離心濃縮管聯系電話
微濾中膜的孔徑大小通常以微米計,表示大于這一規格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據 NMWL分級,有時也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見,實踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時膜截留分子量應該充分大于流過的溶質。當膜材料相同時,孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設備構造等。因此常常發生同樣 NMWL 的膜對一定范圍內的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進行樣品濃縮或除鹽時,需要謹慎地選擇合適的NMWL膜和設備。虹口區濃縮管規格超濾濃縮管的優點有很多。
用超濾對分子進行分級 通過選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實際。事實上,膜的規格描述是基于截留而非通過 的性質。一項實驗中,采用 100k NMWL 濾膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但這時比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過濾膜, 75kDa 的分子截留率為 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 種成分通過膜并不像單一成分的溶液那么簡單和容易。實 踐中,如果要分離兩種大分子,它們之間的分子量差異應該達到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 規格在兩種蛋白之間,則可達到比較理想的 分離。如果蛋白溶液較為稀釋,低壓下操作也有助于達到更好的效果。
上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規格可選)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優化。 用Protein A或G對抗體進行親和純化根據您的具體需求選擇不同的超濾濃縮管設計。
雖然影響因素較多,我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時節省過濾時間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計,表示大于這一規格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據NMWL分級,有時也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見,實踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時 膜截留分子量應該充分大于流過的溶質。當膜材料相同時,孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設備構造等。因此常常發生同樣 NMWL 的膜對一定范圍內的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進行樣品濃縮或除鹽時,需要謹慎地選擇合適的 NMWL膜和設備。雖然影響因素較多,我們通常建議截 留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時節省過濾時間。益啟生物公司主營超濾濃縮管銷售。奉賢區默克2ml超濾濃縮管咨詢問價
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如果能確保用同樣的超濾管對其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個目的蛋白的原因。有時蛋白會因其本身的一些特性(構象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級別的超濾管(如原本選用30k,此時可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請參考上面的關于蛋白沉淀問題的解釋。金山區默克離心濃縮管聯系電話
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