脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心，總耗時~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優化選做：加入1.5 mL用于置換的緩沖液，1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規格可選）。 4. 加入1.5 mL樣品，4,000×g離心15 min進行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液，4,000×g離心15 min，換液的同時進行濃縮。 6. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進行較大體積操作時，可以適當延長離心時間，也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細信息。購買超濾濃縮管就找益啟生物公司。南京Millipore超濾濃縮管代理價

加入漂洗緩沖液（體積是樹脂柱床體積的7.5倍）并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液（體積是樹脂柱床體積的5倍）與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min?；厥展苤屑醇兓玫牡鞍?。 6. 如果是純化抗體，在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時，可以延長結合反應時間，并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。無錫默克0.5ml超濾濃縮管報價一個好的超濾濃縮管代理銷售需要具備哪些特點您知道嗎？

這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應用兼容，常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進行緩沖液置換。傳統透析方法需要時間很長，多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活，而且***還需要一步濃縮。新產品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新，需一步溫和的滲濾操作即可達到同時對樣品進行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標準 操作步驟的優化與簡化往往帶來更好的結果，數據的穩定性、可比性和高通量化隨之得以改 善，默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體，減少樣品轉移損失和人為操作的繁瑣和誤差，使蛋白樣品的處理更加標準化，數據結果便于評估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。

上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規格可選）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min，置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管～1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法，但溶液體積和離心時間等需要略加優化。 用Protein A或G對抗體進行親和純化超濾濃縮管的各種系列應用領域還是不一樣的。

膜的吸附損失 對于濃度很低及珍貴的樣品，除了考慮截留效率和操作方便外，額外 要關注的是采用的超濾膜及設備對目標蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質對生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對生物分子吸附**小，是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產品成為優先的**技術關鍵之一。濾膜和裝置表面對溶質的 吸附對樣品收率會產生直接影響，所以如果希望盡可能提高得率，就 應該考慮采用較小的設備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應該選 用膜面積小的裝置，同時保證一定的流速。默克密理博設計了一系列 離心式或攪拌式裝置，配合不同的膜面積、不同的截留分子量的切向 流系統，支持您獲得理想的處理效果。超濾濃縮管應用領域你知道嗎。黃浦區默克超濾濃縮管參數

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外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ，4000g離心 X 10 min。 從超濾管內管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進行緩沖液置換，溫柔吸打樣品數次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *南京Millipore超濾濃縮管代理價

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