外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標準,相較于需要昂貴的設備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題,真是惠而不費,不亦樂乎?超濾濃縮管的系列有很多。金山區默克超濾濃縮管商家
超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學性質、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會透過,因此在大分子樣品處理中得到了應用。膠狀或微粒狀物質也能夠被截留。UF膜既可以用于透過樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑,則經過膜處理可以達到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠遠大于膜孔徑,膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對于樣品更溫和,沒有發生容易導致生物大分子失活的相變,而且在濃縮的同時可以完成對溶質的除鹽。超濾的應用不限于蛋白樣品的操作,也常用于核酸樣品制備,包括分子克隆和質粒純化。DNA和RNA樣品起始濃度低至5ng/mL也可以被高效地在數分鐘內被濃縮,回收率達到99%以上。常州默克離心濃縮管規格那么超濾濃縮管施工的優勢都有哪些呢?
高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使用的離心管,可以用于2-15mL生物樣品的純化、濃縮、脫鹽等過濾應用。這種離心超濾管流速很快,設計緊湊,螺旋蓋使用起來非常方便,過濾收集管內置低吸附的Ultracel?再生纖維素膜,裝有氣密蓋。 優點與應用 特有的反向流操作模式,較大的死體積 采用Ultracel?膜,用于濃縮和純化富含顆粒物 的高濃度樣品,樣品回收率>90% 配合標準的50mL離心管吊籃式轉子使用 從發酵培養基、細胞培養基、細胞裂解液中分 離低分子量溶質
溫和的高濃度樣品濃縮、脫鹽裝置 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾杯 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾裝置對于高濃度(達 百分之十)達分子溶液快速濃縮和脫鹽提供了的可行方法。做蛋白濃縮時,向超濾裝置中導入氣壓,大于超濾膜截留分子量的溶質將被截留在容器內,水及小于超濾膜截留分子量的溶質(如鹽分)會被過濾并排出。加壓拌式設計防止濃縮的樣品發生沉淀,比離心超濾溫和,對于高濃度、易沉淀樣品的進一步濃縮同時脫鹽等應用是比較好選擇。配套選擇的超濾膜可以滅菌并經處理后反復使用,更為經濟。上海超濾濃縮管代理銷售哪家好?
離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時,原溶液已經被換成選定的溶液。 化學相容性與溶出 樣品的化學背景有時很多樣而復雜,過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學成分發生反應而產生溶出污染。關于默克密理博各種微濾、超濾產品的化學相容性請參考產品使用說明書或垂詢技術支持專線 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標溶質,但膜的很多特性會對這一目的產生影響。影響回收的因素包括:? 標稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量超濾濃縮管服務電話是多少呢。無錫默克0.5ml超濾濃縮管代理價格
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脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心,總耗時~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優化選做:加入1.5 mL用于置換的緩沖液,1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規格可選)。 4. 加入1.5 mL樣品,4,000×g離心15 min進行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液,4,000×g離心15 min,換液的同時進行濃縮。 6. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進行較大體積操作時,可以適當延長離心時間,也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細信息。金山區默克超濾濃縮管商家
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