近年來隨著分離純化技術的提高，關于外泌小體的研究成果頗豐；這進一步吸引了越來越多領域的課題將外泌體納入研究對象。研究的前提是方便、高效、標準化地分離純化外泌小體。經過近20年的探索，已經建立了超速離心法、沉淀法、色譜法、親和純化法等。在大量實踐中大家逐漸認識到根據下游研究對樣品的要求，以及起始樣品的規模、數量，可以選擇不同的外泌體制備策略。因不需要特殊的設備和試劑盒，對操作人員也沒有特別的經驗要求，超濾法后來居上，成為實驗室中制備外泌體的通用方法。益啟生物公司的超濾濃縮管種類繁多。虹口區Merck離心濃縮管代理價

蛋白親和純化（無需換液和濃縮） * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管～1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法，但溶液體積和離心時間等需要略加優化。 3次低速離心，總耗時~75分鐘（含60分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂（沉降的柱床體積）和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。（柱床）樹脂量≥ 500μL時采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*，其間可溫和攪動促進結合。嘉定區Merck離心濃縮管參數上海Millipore超濾濃縮管授權代理商！

外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ，4000g離心 X 10 min。 從超濾管內管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進行緩沖液置換，溫柔吸打樣品數次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *

Amicon? Ultra 4 mL 超濾管 -離心速度快而保持很高的回收率 4 種不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon? Ultra 4mL 超濾管中濃縮（3kDa 細胞色素 C， 10kDa 細胞色素 C，30kDa BSA，100kDa IgG）， 測定在離心一定時間后的回收率。數據顯 示所有樣品在離心 15 分鐘左右回收率均 >95%。 為了方便初次使用者選擇**合適的超 濾管產品，默克密理博生命科學部網 站上提供選擇指引，您需要按照提 示進行選擇，**終會選出一款產品。 為每次實驗選擇**合適的， 您也能快速成為超濾高手！益啟生物公司專業致力于超濾濃縮管代理銷售。

Centrifree?過濾器 Centrifree? 過濾器擁有研究及體外診斷證書（美國適用），是為臨床研究實驗室的樣品制備而設計的，能夠快速、高效地通過超濾去除小體積（0.15–1.0 mL）血清、血漿等生物樣品中的蛋白未結合的小分子溶質。數分鐘之內完成精確的分離，樣品終體積約為 10μL；不會發生樣品稀釋、pH 值變化、離子成分變化或未結合小分子溶質濃縮等情況。這種產品使用的是低吸附的再生纖維素膜，親水膜和 O 型圈，不含增塑劑，確保獲得較好的樣品回收效果。 優點與應用： 分離血清、血漿等生物學樣品中未 吸附的小分子物質 精確的藥物結合實驗樣品制備使用 去除生物樣品中的蛋白質等大分子 的干擾，減少樣品復雜性 測 定 游 離 型 智療 藥 物、睪 丸 基素、 甲 狀 腺 素 等，用 于 生 物 活 性 研 究、 藥物結合分析等新藥評估過程對于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。寶山區默克2ml超濾濃縮管聯系方式

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抗體標記 適合25-200μg樣品操作 5次低速離心，總耗時~50分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 加入抗體樣品 ? 對于比較稀釋的樣品（< 1 mg/mL） - 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）。 - 加上至多1 mL抗體樣品， 4,000×g離心15 min。 ? 對于濃度較高的的樣品（≥ 1 mg/mL） - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）中加入至多100μL樣品。 - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）中加入至多100μL樣品。 大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內濃縮至350μL；死體積設計確保樣品不會被離干而損失。 虹口區Merck離心濃縮管代理價

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