用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預(yù)切超濾膜片 Ultracel? 再生纖維素膜可以用來對(duì)較為稀釋的溶液進(jìn)行脫鹽或濃縮。Ultracel? 膜是親水性的,微觀結(jié)構(gòu)緊密,確保對(duì)蛋白、核酸等大分子吸附比較低而回收率比較高。 *膜的常規(guī)截留分子量分為1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直徑分為25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 對(duì)于大體積、高濃度(如蛋白濃度大于 1.0 mg/mL)的樣品進(jìn)行脫鹽和濃縮,Biomax?聚苯醚砜(PES)超濾膜是很好的選擇。血清、血漿或條件組織培養(yǎng)基等,都是 Biomax?超濾膜適合處理的樣品。 *膜的常規(guī)截留分子量為5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。 *膜直徑分為25,44.5,47,63.5和76mm。那么超濾濃縮管施工的優(yōu)勢(shì)都有哪些呢?默克4ml超濾濃縮管訂購(gòu)
外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過濾,這個(gè)時(shí)候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對(duì)樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號(hào)UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進(jìn)行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *默克4ml超濾濃縮管參數(shù)對(duì)于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。
膜的吸附損失 對(duì)于濃度很低及珍貴的樣品,除了考慮截留效率和操作方便外,額外 要關(guān)注的是采用的超濾膜及設(shè)備對(duì)目標(biāo)蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質(zhì)對(duì)生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對(duì)生物分子吸附**小,是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產(chǎn)品成為優(yōu)先的**技術(shù)關(guān)鍵之一。濾膜和裝置表面對(duì)溶質(zhì)的 吸附對(duì)樣品收率會(huì)產(chǎn)生直接影響,所以如果希望盡可能提高得率,就 應(yīng)該考慮采用較小的設(shè)備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應(yīng)該選 用膜面積小的裝置,同時(shí)保證一定的流速。默克密理博設(shè)計(jì)了一系列 離心式或攪拌式裝置,配合不同的膜面積、不同的截留分子量的切向 流系統(tǒng),支持您獲得理想的處理效果。
蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過 20mg/ml。對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白,建議的改進(jìn)方法是: 1)離心力降為推薦離心力的30%-50% 2)改用截留分子量更大的超濾管(如原本選用10k,此時(shí)可以選擇30k) 3)在濃縮過程中取出超濾管,用***頭反復(fù)吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現(xiàn)這種情況,請(qǐng)先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應(yīng)立即使用,如暫時(shí)不用,請(qǐng)保持潤(rùn)濕狀態(tài),避免重新干燥。一個(gè)好的超濾濃縮管代理銷售需要具備哪些特點(diǎn)您了解嗎?
這種小管適合在1.5mL離心機(jī)中使用,其Ultracel?超濾膜對(duì)于蛋白及其它成分都表現(xiàn)出 極低的非特異性結(jié)合,連同醫(yī)藥級(jí)O型圈封閉設(shè)計(jì),確保更少的樣品丟失,更穩(wěn)定的數(shù)據(jù)結(jié)果。諸多考慮周到的精細(xì)設(shè)計(jì)使Microcon?成為比較好用的樣品制備工具之一。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 低吸附膜和反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì),即使是小體積、低濃度樣品得率也能達(dá)到95%以上 可以用產(chǎn)品自帶的1.5mL樣品收集管存儲(chǔ)濾過液和濃縮產(chǎn)物 濃縮倍數(shù)可達(dá)100X 操作簡(jiǎn)便快捷,易于標(biāo)準(zhǔn)化。 Microcon? DNA Fast Flow 超濾管 專門設(shè)計(jì)用于從含有SDS的溶液中濃縮和回收基因組DNA。管子和膜均為低非特異性吸附的材質(zhì),醫(yī)用級(jí)O型圈密封,保證了在洗滌步驟中樣品丟失**少。反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì),即使樣品量很小也能獲得理想的得率,濃縮倍數(shù)可以達(dá)到20X。超濾濃縮管的系列有很多種。崇明區(qū)默克離心濃縮管商家
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微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì),表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù) NMWL分級(jí),有時(shí)也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見,實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí)膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí),孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對(duì)一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時(shí),需要謹(jǐn)慎地選擇合適的NMWL膜和設(shè)備。默克4ml超濾濃縮管訂購(gòu)
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