Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]一個好的超濾濃縮管代理銷售需要具備哪些特點您了解嗎?徐匯區默克2ml超濾濃縮管規格
無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據樣品的粘稠程度,以及需要制備的目標外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa),以便達到更好的得率和操作體驗。 樣品體積大于 30mL 時可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管,請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內時吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進一步提高特定外泌體的純度,可選用包被相應抗體的磁珠進行親和純化精制。無錫默克超濾濃縮管上海超濾濃縮管銷售公司電話多少?
離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時,原溶液已經被換成選定的溶液。 化學相容性與溶出 樣品的化學背景有時很多樣而復雜,過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學成分發生反應而產生溶出污染。關于默克密理博各種微濾、超濾產品的化學相容性請參考產品使用說明書或垂詢技術支持專線 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標溶質,但膜的很多特性會對這一目的產生影響。影響回收的因素包括:? 標稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量
基于 Millipore? 先進的膜過濾技術,默克密理博開發了獨特的腺***及慢***純化與濃縮試劑盒。試劑盒中已經包括了必需的 Steriflip? 過濾裝置和超濾管,能在短短 2 小時內安全、快捷地獲得高產***。 節約時間:整個操作需 2 小時。 產量高:***回收率超過 70%。 整體體驗極好:流程簡便而***質量高。 設計新穎易操作:Steriflip? 過濾裝置可以替代昂貴的設備,使原本繁瑣凌亂的操作變得簡單而標準。 安全:封閉的真空抽濾設計,完全避免樣品飛濺造 成的***污染和損失。超濾濃縮管的好處有很多。
蛋白復性,溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理,采用溫和的透析方法可以避免其在過度濃縮時發生沉淀和離心操作剪切力對樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設計的透析管,**提高了樣品透析表面積,在2-5小時內即可完成透析,是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨特優點: 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質,增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會像使用夾子或打結那樣造成樣品滲漏和污染,安全可靠 旋蓋式設計,易于打開和關緊 硬管設計,易于更充分地吸取、移走樣品,即使是μL級樣品加樣方便,功能多樣 ? 采用標準***頭加樣,而非注射器和針頭加樣,減少膜破損的風險提供的浮漂適合在常見的廣口燒杯中使用,方便在透析過程中換液D-Tube? 透析管還可以用于從瓊脂糖或丙烯酰凝膠電洗脫樣品益啟生物公司的超濾濃縮管系列有很多。無錫默克超濾濃縮管
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多臺同時操作模式 借助Amicon?超濾杯多臺操作連接裝置可以同時運行多達3個超濾杯。 Amicon? stirred cells 耐溶劑型攪拌式超濾杯 用于對在有機溶劑中的樣品進行濃縮和緩沖液置換。有 47mm 和 76mm 兩種規格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等會降低碳氟化合物材質 O 形圈的使用壽命。 特點與優點: 采用圓柱形硼硅酸鹽玻璃容器和 PTFE 超好化學兼容性超濾膜 可預裝膜后進行高壓滅菌 直接從上面操作,避免拆卸裝置的麻煩 組件少,易于清潔和組裝 配套使用 47 或 76 mm 直徑預切膜片 應用: 帶有有機成分的樣品的濃縮、換液徐匯區默克2ml超濾濃縮管規格
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