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來源: 發(fā)布時間:2023年09月15日

取上述200μL細胞液加入小室,下室(培養(yǎng)板)加入900L含有10% FBS的培養(yǎng)基。不同規(guī)格的小室和培養(yǎng)板所加的體積不同,具體參考Millicell?產品說明書。37°C孵育24至72小時,依據**細胞類型而定。孵育結束,小心取出細胞小室,吸掉小室上層培養(yǎng)液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%結晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后進行第8步或者第9步。PBS清洗兩次以去除多余的染料,立即用棉簽擦去濾膜上層的細胞,自然靜置風干。顯微鏡下觀察濾膜下層的細胞,隨機選取不同的視野計數并算平均值。結晶紫溶解濾膜下層細胞,然后用33%醋酸脫色,將結晶紫完全洗脫下來,洗脫液可在酶標儀上570nm讀取OD值。這種方法可以避免視野下細胞穿透不均勻帶來的誤差。上海益啟生物的添加劑詢價公司電話。崇明區(qū)細胞培養(yǎng)銷售

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PET膜(聚酯)* 用于貼壁細胞的生長,無需胞外基質 這種蝕刻的薄膜式半透明的或者在光學顯微鏡下是透明的,所以可以對細胞單層提供更好的細胞可視性和監(jiān)測。經組織培養(yǎng)基處理以促進細胞黏附性和生長 *這些膜均為親水性膜 多孔插入式細胞培養(yǎng)板 無菌、即用的多孔插入式細胞培養(yǎng)板目前有24孔和 96孔兩種。獨特的設計,例如頂部輔助和淚珠狀的 孔形,使Merck Millipore的板相比常規(guī)的多孔插入式 細胞培養(yǎng)板使用更加方便且重復性**提高。 頂部加樣保護細胞單層

c ) 用無血清的冷培養(yǎng)基稀釋ECM 膠至2 0 μ g/mL ,以5-10μg/cm2的密度加入到細胞小室的上層(按照ECM產品說明書的推薦比例和體積),輕輕搖晃使膠均勻鋪在膜上。以上操 作在冰上進行。 d)立即將鋪好ECM膠的細胞小室置于培養(yǎng)板中,于37°C孵育1小時,ECM膠可由液體凝成固體,吸走多余的或者未凝的膠。細胞用PBS清洗一次,EDTA或者0.05%胰酶消化,然后用包含5%BSA的無血清培養(yǎng)基中和,1500rpm離心5-10min。用無血清培養(yǎng)基重懸細胞,調整細胞密度至0.5-2.0x106cell/ml。上海益啟生物的聯系電話。

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