為了解決外泌體實驗遇到的上述的各種問題,Wako研發出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS(MagCapture?ExosomeIsolationKitPS)提取高純度細胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細胞源的蛋白和脂質,眾所周知磷脂酰絲氨酸(PS)在活細胞通過翻轉酶作用導向細胞膜內側,暴露在外泌體膜外側3)。另外,T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4(Tim4通過巨噬細胞進行細胞凋亡的吞噬受體)蛋白通過細胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結合4)?;谏鲜鲋R,我們利用Tim4固化磁珠,在鈣離子存在下捕捉培養上清和血清等樣品中的外泌體,再添加螯合劑洗脫外泌體,這種外泌體純化方法是和金澤大學醫學系免疫學華山教授共同開發,并取得了成功。5)這是迄今為止取代黃金標準超速離心法的新型外泌體純化方法。因外泌體內含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質對相鄰細胞具有交換信息的功能。羊水提取試劑盒價格
目前市面上開發的外泌體提取試劑盒,是根據外泌體表面由類似于細胞膜的脂質雙分子層具有一定疏水性這一特性,用試劑捆綁水分子,從而可通過常規離心收集沉淀獲取外泌體。這種快速提取外泌體的方法雖簡便快捷、樣本需求少、對設備要求低,但與差速離心方法類似,其分離得到的沉淀包含其他細胞分泌的囊泡,且血清中含有大量血清蛋白分子,成分復雜,很可能摻雜一些未知的疏水大分子物質。Sabapatha等曾根據來源于胎盤的外泌體表面特異表達這一特性,使用耦合到磁珠的抗抗體,采用磁珠分選方法分離血漿中胎盤來源外泌體。此法可以提取的胎盤外泌體量少,不適用于大規模提取制備,且免疫磁珠價格昂貴,不利于提取技術的普及。羊水提取試劑盒價格外泌體復雜的內容物被認為是疾病診斷的無創或微創生物標志物。
利用抗ai癥藥物進行中流zhiliao是抑制中流的一個重要方法,不過目前抗ai癥藥物的運載存在著種種挑戰,主要體現在以下幾點:(1)抗ai癥藥物的疏水性;(2)抗ai癥藥物的毒性以及非靶向性;(3)易被人體清chu,體內循環的半衰期很短等。采用外泌體運輸抗ai癥藥物,可以提高藥物體系的水溶性,降低藥物對人體的毒性以及避免被網狀內皮系統捕捉從而延長其循環時間。近期,兩種抗ai癥藥物———紫杉醇(PTX)和阿霉素(DOX)已經成功被載入外泌體中,并對其抗中流作用進行了研究。
血清和血漿為常規檢測樣本,具有微創取樣的優點,是診斷疾病的理想樣本。血液中外泌體能夠作為胰腺ai、胃ai、肺ai和阿爾茲海默等疾病的早期診斷和療效評價提供潛在標志物。血液外泌體來源的疾病標志物主要包括蛋白質和miRNA兩類。Melo等發現利用胰腺ai細胞外泌體表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能夠實現胰腺ai早期診斷,利用該方法對血清中包含GPC1的外泌體進行檢測,能夠高特異性(100%)、高靈敏度(100%)地區分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例)。免疫印跡法(WB)和Elisa檢測法作為被普遍應用的外泌體檢測的一般方法。
雖然系統遞送的外泌體主要在肝臟、腎臟和脾臟中積累,但通過在外泌體的外表面上展示特定的靶向分子。例如,識別靶抗原的肽或抗體片段,可以獲得靶向外泌體;通過在細胞分泌囊泡上展示糖基磷脂酰肌醇(GPI)錨定的納米抗體,可以使細胞分泌囊泡顯示多種蛋白,包括抗體、熒光蛋白和信號分子。自然分泌的外泌體分離純化直接作為藥物的潛力有限,但是,將自然的外泌體分泌所需組分摻入合成脂質體或納米顆粒中,并且使用可控程序組裝后的工程化外泌體模擬物在藥學上擁有更大的應用潛力。類風濕關節炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體。羊水提取試劑盒價格
外泌體及其攜帶的組分參與肝臟細胞的增殖、再生和遷移等生理過程,在肝臟疾病和肝損傷中起著重要作用。羊水提取試劑盒價格
外泌體(exosomes)是一類由細胞分泌到胞外的囊泡。與其他兩種胞外囊泡(微囊泡和凋亡小體)相比,外泌體在產生方式、尺寸、密度和內容物等方面存在明顯差異。不同于微囊泡“出芽”的形成方式,外泌體主要通過胞吐過程釋放至細胞外:首先細胞膜向內凹陷形成早期核內體(earlyendosomes),早期核內體進一步內陷形成多泡體(multivesicularbodies,MVBs),其中一部分多泡體與溶酶體(lysosome)融合,進而降解;另一部分與細胞膜融合,將其內部所包含的囊泡釋放至胞外,即為外泌體。外泌體具有獨特的物理化學性質,其直徑為30~200nm,密度為1.13~1.19g/mL,組成包括細胞來源相關的脂質、蛋白質、RNA、DNA等物質,在其表面連接有大量的糖鏈,如甘露糖、聚乳糖胺和α2,6-唾液酸等。羊水提取試劑盒價格