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黑龍江CD81外泌體慢病毒

來源: 發布時間:2024年01月20日

一類外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調節外泌體膜與受體細胞的融合,有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現于早期以及回收的核內體中,RAB7和RAB9主要出現于晚期的核內體。現有大量的研究發現外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯蛋白(包括膜聯蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族、熱休克蛋白家族。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶、核糖體蛋白(RPS3)、信號轉導因子(黑色素瘤分化相關因子,ARF1,CDC42,人類紅細胞膜整合蛋白,SLC9A3R1)、粘附因子、細胞骨架蛋白以及泛素等。外泌體并作為癥狀早期診斷技術,應用于與癥狀進展相關的研究。黑龍江CD81外泌體慢病毒

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流式細胞技術針對外泌體的表面抗原標記物進行檢測,能夠實現外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低,所以采用常規的流式細胞儀進行檢測時往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強反射,操作耗時又費力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細胞儀(HSFCM),將可檢測的外泌體粒徑降至40nm,能夠在不連接beads的情況下實現每分鐘10000個外泌體的檢測,并且能夠結合免疫熒光的方法進行外泌體標志蛋白質的定量檢測,目前該儀器已商品化。黑龍江CD81外泌體慢病毒外泌體復雜的內容物被認為是疾病診斷的無創或微創生物標志物。

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外泌體攜帶的與疾病進展緊密關聯的分子標志物可用于疾病進展的監視、檢測和診斷,是一種潛在的非侵入性生物標志物。由于外泌體本身可以作為抗原提呈小泡,且有較長的循環半衰期,可用于免疫學相關研究,同時,源自ai細胞的外泌體可以被工程化,發揮免疫刺激作用,可作為中流疫苗應用于ai癥的免疫zhiliao。此外,外泌體穩定而廣fan地分布在qi官和組織中,具有低免疫原性、高耐受性等特點,且良好的膜滲透性可使其通過血腦屏障,因此可用作組織和qi官特異藥物輸送系統,兼有高輸送效率和低副作用。因此,外泌體適合用作藥物載體遞送zhiliao劑(如阿霉素或姜黃素),zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白質,運送至靶位點后實現靶向zhiliao。

多項研究表明中流細胞來源的外泌體能夠抑制免疫相關的信號通路、阻礙機體對中流的免疫響應。Chen等研究發現黑色素瘤細胞、乳腺ai和肺ai細胞會產生攜帶程序性死亡分子1的配體(programmedcelldeath1ligand1,PD-L1)的外泌體,此類外泌體在血液中循環,通過表面PD-L1與T細胞結合,導致T細胞在到達中流細胞之前即受到抑制,達到遠程干擾免疫細胞活性的效果。中流來源的外泌體能夠抑制骨髓來源的抑制性細胞(該細胞是樹突狀細胞(dendriticcells,DCs)、巨噬細胞和(或)粒細胞的前體,具有抑制免疫細胞應答的能力)對中流的免疫監督。中流細胞來源的外泌體與巨噬細胞共孵育后,其內的miRNA-301a通過下調抑ai基因PTEN),激huoPI3Kγ(phosphoinositide3-kinaseγ)信號分子,使巨噬細胞被“馴化”成為能參與抗yan反應、血管生成以及促進中流生長轉移的M2型巨噬細胞。外泌體的異質性可以根據其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來區分。

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外泌體是細胞間信息傳遞的重要“信使”,可通過三種方式介導細胞通訊:(1)外泌體以旁分泌的方式與靶細胞相互作用,通過受體–配體作用黏附到靶細胞表面,隨后被內吞入靶細胞,或直接將內容物釋放到靶細胞內,從而激huo靶細胞;(2)外泌體的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割,產生的片段可以與靶細胞的細胞表面受體結合,從而激huo靶細胞;(3)外泌體還可以與靶細胞直接接觸發生膜融合,導致外泌體中的蛋白和核酸非選擇性轉移到目標細胞,從而引起靶細胞的響應。通過介導細胞間的通訊,外泌體不jin能夠參與多種生理過程,比如消除胞內陳舊分子、呈遞抗原、分化調節性T淋巴細胞或髓樣細胞以抑制免疫反應,而且還可以參與疾病形成的病理過程,如通過與受體細胞的相互作用傳播病原物質、促進中流轉移過程中的血管生長和中流細胞遷移。因外泌體內含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質對相鄰細胞具有交換信息的功能。黑龍江CD81外泌體慢病毒

外泌體提純方法中,超速離心法和聚合物沉淀法(市售試劑盒)混入多種雜質。黑龍江CD81外泌體慢病毒

中流細胞分泌的外泌體可以通過體液進入特定qi官,建立有利于ai細胞生長的微環境,包括促進受體細胞上皮細胞-間充質轉化、引發炎癥、促進血管生成,為ai細胞的擴散形成有利條件。進一步研究發現中流細胞外泌體能夠引導ai癥轉移至特定qi官,在膜表面特異性整合素的作用下,中流細胞外泌體首先在特定的qi官累積,引起受體qi官產生炎癥、生成血管,形成有利于中流轉移的微環境,使得中流細胞更容易轉移至該qi官。Maji等揭示了惡性中流細胞外泌體中的AnnexinⅡ蛋白能夠促進血管生成,為中流轉移創造有利的微環境。黑龍江CD81外泌體慢病毒

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