一類外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調節外泌體膜與受體細胞的融合,有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現于早期以及回收的核內體中,RAB7和RAB9主要出現于晚期的核內體?,F有大量的研究發現外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯蛋白(包括膜聯蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族、熱休克蛋白家族。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶、核糖體蛋白(RPS3)、信號轉導因子(黑色素瘤分化相關因子,ARF1,CDC42,人類紅細胞膜整合蛋白,SLC9A3R1)、粘附因子、細胞骨架蛋白以及泛素等。外泌體的納米球膜型結構由雙層脂質形成。細胞上清外泌體提取試劑盒報價
外泌體的形成始于細胞內陷,成熟于多囊泡胞內體,終于膜融合。細胞通過內吞作用產生小囊泡,小囊泡融合形成早期胞內體(earlyendosome),在多個蛋白的協同調控下,早期胞內體出芽形成含有多個腔內小囊泡的多泡體(multivesicularbodies,MVB),這個過程中這些腔內小囊泡(intraluminalvesicles,ILVs)會裝載各種核酸和蛋白質等分子,泡內體較后在GTPase家族中RAB酶的調節下與細胞膜融合。隨后,這些小囊泡會被釋放到細胞外,稱為外泌體。外泌體是通過細胞內吞細胞膜融合主動排除的物質,大小均勻,而微泡是由細胞直接出芽脫落生成,大小不均一。細胞上清外泌體提取試劑盒報價在從體液中提取外泌體后,體液可長期穩定保存。
瘤釋放的外泌體可以通過削弱免疫效應細胞的反應和激發免疫抑制細胞的擴增,來營造一個免疫抑制的環境。瘤釋放的外泌體可以替代瘤細胞接受免疫系統的攻擊,從而幫助瘤細胞逃過免疫系統的識別。瘤釋放的外泌體可以引發炎癥,利用基質浸潤細胞的反應營造出利于瘤生長的微環境。研究表明,在過去短短的5年里,對外泌體的研究已經取得了比較好的的進展。如今,收集并分析瘤釋放的外泌體已經成為液體活檢的一個重要研發方向。靶向瘤釋放外泌體的治理策略將對改善病癥患者的命運發揮出舉足輕重的影響。
尺寸排阻色譜法(SEC)根據大小來分離樣本。該技術應用了一個裝有多孔聚合物珠的色譜柱,該聚合物珠包含多個孔和通道,分子根據其直徑穿過。半徑小的分子穿過柱子的孔遷移需要較長的時間,而大分子則較早地從柱子上洗脫下來。SEC可精確分離大分子和小分子。與離心分離方法相比,SEC分離的外泌體不受剪切力的影響,剪切力可能會改變囊泡的結構。此方法分離到的外泌體純度較高,在電鏡下大小均一,但是獲取量少,所需設備特殊。此外,SEC方法與超濾相結合已被用于尿液來源的外泌體的分離和分析。外泌體為細胞療法中的不同合成分子和生物分子的遞送提供了廣闊的前景和嶄新的診療領域。
細胞外囊泡是蛋白質、mRNA、miRNA和脂質運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介,根據它們的大小和發生分為三類,包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中,外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,由多種細胞分泌,內含有特定的蛋白質、脂質、細胞因子或遺傳物質。來源于不同的組織的外泌體不只具有其特異性蛋白分子,而且還包含其行使功能的關鍵分子。近年來,隨著外泌體研究的不斷深入,它的應用已經涉及瘤子診療領域、醫學基礎和免疫領域、寄生蟲領域;臨床研究上已涉及心血管系統、內分泌代謝系統等。超速離心是目前分離外泌體的主要技術。膜受體的識別是外泌體細胞反應的基礎,它可能活躍受體并隨后導致相關信號通路的活躍。細胞上清外泌體提取試劑盒報價
外泌體提取在短時間(一周之內)使用,可以放在4度保存,如果長時間保存可以放在-20度或-80度保存。細胞上清外泌體提取試劑盒報價
科學家也嘗試利用外泌體的壓制發病機制功能。例如,類風濕關節炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體,高濃度集聚誘導細胞死亡的TNF-α,可使類風濕關節炎惡化。通過上述介紹可以知道癥狀細胞來源的外泌體含有與癥狀進展相關的分子,神經細胞來源的外泌體含有與神經退行性疾病相關的分子,因此,通過壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發生。隨著今后的研究發展,外泌體功能逐步清晰,并擴大臨床應用,有望將外泌體應用在各種疾病醫治上。甚至可嘗試利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運輸到目標細胞中。細胞上清外泌體提取試劑盒報價
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