與PC-3細胞相比,PC-3細胞外泌體中含有較高豐度的鞘糖脂、鞘磷脂、膽固醇和磷脂酰絲氨酸。外泌體常見的表面蛋白質包括四跨膜蛋白(如CD63、CD9、CD81)、黏附蛋白(如L1CAM、LAMP2)、整合素和糖蛋白(如纖連蛋白)等,而外泌體囊泡內蛋白質則與來源細胞內的蛋白質密切相關,包含例如熱休克蛋白(HSP70、HSP90)和細胞骨架蛋白(actin、tubulin、cofilin)等。除此之外,外泌體中還攜帶有來源細胞的miRNAs、mRNAs、non-codingRNAs、circularRNAs和DNA等遺傳物質。外泌體的完整囊泡結構能夠保護其內部生物分子不受體液中各種酶的影響從而保持其完整性和生物活性。外泌體作為一個新型的研究熱點,由于它在體內存在的普遍性和獲取的便捷性。外泌體分離試劑盒
外泌體是新型治理劑,惡性瘤細胞往往能夠通過分泌大量外泌體抑制宿主固有免疫。對外泌體的質譜研究發現,惡性瘤細胞的外泌體含有大量活化型的表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR),可以抑制宿主細胞α型干擾素(IFN-α)的產生。這就解釋了為什么部分瘤患者固有免疫低下,也為晚期病癥患者的治理提供一個新的策略和理論依據。除了瘤,外泌體在其他疾病如心血管疾病等的診斷和治理的相關臨床試驗也在世界范圍內開展中。外泌體分離試劑盒免疫印跡或蛋白質印跡是分析外泌體較常用的方法之一,其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結合。
外泌體的提取分離方法:1、超濾離心:由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質,利用不同截留相對分子質量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離,便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效,且不影響外泌體的生物活性,是提取細胞外泌體的一種新方法。2、磁珠免疫法:外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態完整等優點,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以普遍普及。
與正常細胞相比,中流細胞外泌體的分泌量增多,內容物也存在明顯差異。由于囊泡結構的保護,中流細胞來源的外泌體內攜帶有大量中流細胞來源的活性生物分子,其特點包括:(1)提供具有穩定構象的蛋白質分子;(2)保持蛋白質的生物活性;(3)攜帶其中的生物分子經體液運輸至遠端qi官;(4)膜融合的作用方式使得中流細胞來源的外泌體能夠與靶細胞之間進行更有效的信息交流。外泌體介導中流轉移:體外研究和體內成像實驗表明惡性中流細胞產生的外泌體可以在全身水平上被同一中流或遠端中流中惡性程度較低的ai細胞攝入,其內所包含的與轉移相關的mRNAs進入轉移性較低的細胞后,能夠增強其轉移能力。外泌體的提取分離方法:PEG-base沉淀法。
干細胞外泌體可直接促進血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。因此,干細胞外泌體可用于中風的治理,改善神經預后,增加血管與神經生成。干細胞外泌體對多種類型的免疫細胞均具有免疫調節作用,包括樹突狀細胞、T細胞、B細胞和巨噬細胞。靜脈輸注干細胞外泌體可抑制CD4+T和CD8+T細胞的活化和浸潤,從而延長GVHD小鼠模型的存活時間,并減少多個組織的病理損傷。干細胞在人類健康領域所發揮出來的潛能,令人驚嘆。而干細胞外泌體,作為干細胞與其它組織細胞相互交流信息的載體,儼然會成為生物醫學研究的新風口之一。外泌體分離之后,需要經過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。外泌體分離試劑盒
外泌體天然的可以攜帶遺傳到靶細胞中,從而在生物學和致病過程中誘導遺傳修飾。外泌體分離試劑盒
外泌體(exosome)是一種由活細胞分泌的,直徑約為40~160nm的具有雙層膜結構的生物活性囊泡。它攜帶了分泌細胞包含的生物活性物質,如DNA、miRNAs、mRNA、長鏈非編碼RNA(LncRNA)、酶、蛋白質和細胞代謝物等。外泌體在細胞間通信中扮演著十分重要的角色。目前對于外泌體的研究涉及包括瘤的發生和發展、侵襲轉移機制、瘤診斷標志物以及藥物傳遞系統等諸多方面。外泌體是一個高度異質性的群體,具有獨特的誘導復雜生物學反應的能力。外泌體的異質性可以根據其大小、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來區分。這些特征的不同組合導致了外泌體的復雜異質性。外泌體分離試劑盒
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