胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗陰性。5、支原體檢驗陰性。6、細菌內的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒陰性。8、大腸桿菌噬菌體陰性。9、支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個/ml,細胞倍增時間≤15h克隆率≥85%。血清的主要作用是提供促接觸和生長因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。福州去外泌體胎牛血清品牌
胎牛血清融化方法:只要2.5個小時,溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節約了時間,而且較大限度減少了血清沉淀出現的幾率。血清融化過程中,蛋白質會比水先融化。冰塊底部亮亮的細絲就是融化中的蛋白,血清在培養細胞中,比較重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過程中較大限度地保留因子的活性,就變得非常重要?;貞浺幌拢毎麖吞K時,要保持細胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個半小時,4℃過夜需要大約10個小時(冰箱一般設2-8℃,所以各實驗室融化時間會稍有出入)。福州去外泌體胎牛血清品牌胎牛血清在無菌條件下要經過0.1微米膜三重過濾,要進行一系列的檢測。
胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內的瓶中。采的血瓶采的血前經干烤滅菌(180℃2小時)后,按無菌操作注入10毫升左右經高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動瓶內生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁后倒出,再進行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時,再放入4℃冷庫4小時以備離心。
胎牛血清的意義:胎牛血清是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血,豐富的生長發育因子,胎牛血清非常適合各種細胞的培養,胎牛血清是細胞培養中重要的天然培養基,胎牛血清起到為細胞提供營養、支持、保護的作用。好的的胎牛血清是讓細胞“快樂成長”的必備營養物,但劣質的胎牛血清,也可能會成為導致細胞死亡的“定時炸雷”。因此,挑選需要擦亮們的雙眼。蛋白含量,總蛋白含量:胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,可能說明牛齡偏大,不是胎牛;數值偏低,表明血清可能摻入水或者其他溶劑。血紅蛋白含量:標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高;反之,數值越低。免疫球蛋白:免疫球蛋白的數值能側面反映出時的牛齡情況,新生牛血清中容易檢出IgM,IgG的含量也偏高,胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。
如何挑選好的胎牛血清:好的胎牛血清是實驗的成功的前提是所有實驗人做細胞培養的共識,如何挑選好的胎牛血清,可以從以下幾個方面著手。1.外觀,好的血清應是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發現血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質變性;若棕紅色,說明,血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現象。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明牛齡偏大,不是胎牛;數值偏低,表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白,標準為不高于,20mg/dl,顏色越紅,數值越高;反之,數值越低。4、pH國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關。胎牛血清加熱可以滅活補體系統。福州去外泌體胎牛血清品牌
胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。福州去外泌體胎牛血清品牌
細胞培養是很多下游實驗的基礎,細胞培養的好壞會直接影響后續實驗的成功和穩定,而胎牛血清作為細胞培養的主要試劑對實驗的重要性不言而喻!胎牛血清是細胞培養中常用的天然培養基,因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細胞生長必須的營養成份,故目前多數實驗人員選擇的都是胎牛血清進行動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數生長的,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到醫治作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。福州去外泌體胎牛血清品牌
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