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血清外泌體lncRNA芯片

來源: 發布時間:2023年03月16日

內化的外泌體和內源性產生的外泌體的細胞旅程:外泌體可以通過不同的機制直接進入細胞。外泌體由細胞通過內吞作用過程從頭生成。外泌體不斷地被細胞產生和吸收。它們可能是新生成的外泌體和消耗的外泌體的混合物。目前尚不清楚內生性產生或消耗的外泌體是一起釋放還是單獨釋放。被吸收的外泌體會被溶酶體降解。進入細胞的外泌體可能進入或與已存在的ESEs融合,隨后解體并將其內容物釋放到細胞質中。另外,內泌體可以與質膜融合并在細胞外釋放外泌體。外泌體其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。血清外泌體lncRNA芯片

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細胞攝取診療性外泌體:從樹突狀細胞、成纖維細胞和間充質細胞中分離出的診療性外泌體可對靶細胞產生特定的作用,包括新抗原呈遞、免疫調節和藥物有效載荷傳遞。診療性外泌體對靶細胞的影響可能是通過不同的進入或相互作用機制來控制的。完整的外泌體的進入可能包括受體介導的內吞作用、網格蛋白包被小凹、脂筏、吞噬作用、小凹和大胞飲作用。外泌體的內容物的進入或外泌體信號的誘導可能涉及配體受體誘導的細胞內信號或融合,從而將外泌體內容物沉積到細胞質中。血清外泌體lncRNA芯片外泌體顯示出了在診療各種疾病(如心肌病和神經病)方面的潛力。

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流式細胞技術是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升。將外泌體表面特異性標志物CD63、CD81等相應抗體進行標記,可用流式細胞儀檢測到陽性表達,從而實現對外泌體的定量。但流式細胞技術檢測時需要單顆粒懸浮液,當外泌體濃度高或分離過程中發生外泌體囊泡聚集時將導致一次觀察到多個顆粒,從而導致數據不準確。因此,為了通過流式細胞儀觀察,需要將外泌體通過免疫捕獲或共價結合固定在磁珠表面上,從而便于將外泌體囊泡暴露于已知或者預期在外泌體表面表達的抗原的熒光偶聯抗體中。在流式細胞術之前,可在落射熒光顯微鏡(EPI)下觀察與磁珠和熒光抗體偶聯的外泌體囊泡。當樣品通過流式細胞儀時采集熒光信號,不只可以對外泌體進行高通量分析,還可以基于抗原表達對外泌體進行定量或分類。

外泌體是分泌的細胞外囊泡的主要群體,是具有生物活性的脂雙層囊泡,大小約為30-100nm,由不同類型的正常細胞和瘤子細胞自然產生和釋放。這些囊泡在細胞間通訊中起重要作用,并影響細胞外環境和免疫系統反應。外泌體通過內體途徑分泌到細胞外空間,并將各種生物活性分子(貨物)轉運至靶細胞。外泌體貨物的組成非常多樣化,包括各種免疫阻止和免疫刺激蛋白、趨化因子、細胞因子、細胞受體、脂質以及不同的核酸,例如miRNA和環狀RNA。外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導正常細胞轉化、促進瘤子發生和轉移等作用。

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外泌體為細胞療法中的不同合成分子和生物分子的遞送提供了廣闊的前景和嶄新的診療領域。外泌體還顯示出了在診療各種疾病(如心肌病和神經病)方面的潛力。但是,在實際應用外泌體之前,需要使用大型動物模型進行進一步研究和臨床試驗。同時需要開發大規模生產質量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術和策略。另外,在研究和評估外泌體的副作用和功效時,必須考慮到肉瘤細胞來源的外泌體可能增強肉瘤生長的潛在風險。外泌體給藥途徑:給藥途徑是獲得所需功效的重要參數。外泌體可以通過多種方法給藥,但是,靜脈內給藥是較常用的途徑。通過利用增強通透性和保留(EPR)效應,在荷瘤動物中靜脈內遞送外來體似乎是有用的。在某些容易達到肉瘤部位的不同惡性肉瘤中,外泌體療法的給藥途徑是瘤內注射。在疾病部位直接注射外泌體的優點是可以特異性地運送裝載的藥物。另外口服給藥,腹腔給藥,皮內給藥和鼻內給藥途徑已成功用于外泌體遞送。磁珠免疫法分離的外泌體,生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以普遍普及。血清外泌體lncRNA芯片

免疫印跡或蛋白質印跡是分析外泌體較常用的方法之一,其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結合。血清外泌體lncRNA芯片

外泌體與免疫反應、病毒致病性、妊娠、心血管疾病、中樞的神經系統相關疾病和病癥進展相關。由外泌體傳遞到受體細胞的蛋白質、代謝物和核酸有效地改變了它們的生物反應。這種外泌體介導的反應可以促進或阻止疾病。外泌體在調節復雜的細胞內通路方面的固有特性使其在許多疾病的診療控制方面具有潛在的用途,包括神經退行性疾病和病癥。外泌體可被設計用于遞送不同的診療有效載荷,包括短干擾rna、反義寡核苷酸、化療藥物和免疫調節劑,并具有將其遞送到預期目標的能力。血清外泌體lncRNA芯片

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