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來源: 發(fā)布時間:2025年02月18日

要了解為什么傳統(tǒng)PCR存在限制,務(wù)必要了解PCR反應(yīng)過程中發(fā)生了什么?;綪CR運(yùn)行可以分為三個階段:指數(shù)期每個循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定**反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動力學(xué)推動反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。線性期(高變異性)隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個循環(huán)的PCR產(chǎn)物不再加倍。平臺期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測)反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時間夠長,PCR產(chǎn)物將開始降解。因?yàn)槊總€樣品具有不同的反應(yīng)動力學(xué),所以每支試管或每個反應(yīng)將在不同的時間點(diǎn)進(jìn)入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內(nèi),傳統(tǒng)PCR進(jìn)行測量,又稱為終點(diǎn)檢測。數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,有需求可以來電咨詢!南京微滴式數(shù)字PCR銷售電話

我國***擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀MiniDrop?研發(fā)成功并投入生產(chǎn)。這是國內(nèi)***微滴式數(shù)字PCR檢測系統(tǒng),能廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、環(huán)境等領(lǐng)域,未來,采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進(jìn)行低成本、高靈敏、快速的無創(chuàng)檢測成為可能。MiniDrop?數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微 流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴,單次運(yùn)行生成400萬微滴,微滴體積達(dá)皮升級,檢測線性范圍達(dá)到5個數(shù)量級,各項(xiàng)指標(biāo)均超越國內(nèi)外主流產(chǎn)品。常州廣州永諾數(shù)字PCR銷售電話浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,有想法的可以來電咨詢!

數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個單元都會對目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對每個單元進(jìn)行熒光信號的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。   

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數(shù)字PCR為juedui定量,qPCR為相對定量,數(shù)字PCR較qPCR更精細(xì)、更靈敏。所以說,未來數(shù)字PCR將成為qPCR的重要補(bǔ)充,在部分領(lǐng)域逐步替代熒光定量PCR。未來這些領(lǐng)域?qū)V泛應(yīng)用到數(shù)字PCR:科研:高校(生命科學(xué)學(xué)院、環(huán)境學(xué)院、醫(yī)學(xué)院、藥學(xué)院)等。醫(yī)院:病理科、血液科、婦產(chǎn)科、心血管科、檢驗(yàn)科、轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心:研究院單位、疾控中心、海關(guān)(出入境檢驗(yàn)檢疫)、質(zhì)監(jiān)局、環(huán)境/環(huán)保局等。企業(yè):第三方檢測機(jī)構(gòu)、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,歡迎您的來電哦!常州廣州永諾數(shù)字PCR銷售電話

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CNV(CopyNumberVariations,拷貝數(shù)變異)研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異,測序方法適用于高于30%的變異率檢測,而qPCR的比較**辨在1.5倍左右,數(shù)字PCR通過直接計(jì)數(shù)目標(biāo)基因與參照基因(拷貝數(shù)為1的基因,例如RNaseP)的數(shù)目, 計(jì)算比值,直接得到目標(biāo)基因的拷貝數(shù)可以達(dá)到極高的拷貝數(shù)分辨精度。除此之外,dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達(dá)研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學(xué)直接相關(guān)的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領(lǐng)域的應(yīng)用都令人極為期待,而在轉(zhuǎn)基因成分鑒定、分子標(biāo)準(zhǔn)品精確定量、環(huán)境樣本檢測等具體的應(yīng)用方向上,已經(jīng)有大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果證明了dPCR技術(shù)的優(yōu)良性能。南京微滴式數(shù)字PCR銷售電話

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