無血清細(xì)胞凍存液,細(xì)胞凍存與復(fù)蘇后,平均活細(xì)胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細(xì)胞存活率都有較佳的表,BI無血清細(xì)胞凍存液也適用于動物血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。復(fù)蘇細(xì)胞:1.將細(xì)胞凍存管由液態(tài)氮中取出,置于37度水浴快速溶解回溫。此時(shí)可準(zhǔn)備培養(yǎng)基、無菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶。2.于生物安全柜內(nèi),直接以少量培養(yǎng)基反復(fù)沖融,使細(xì)胞團(tuán)塊化凍。3.先在無菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基,再將化凍的細(xì)胞懸液加入離心管中。以200~300g,3分鐘離心收集細(xì)胞。4.倒去上清液,以新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。5.隔天更換新鮮培養(yǎng)基,并觀察細(xì)胞存活狀況。使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓。上海無血清細(xì)胞凍存液哪里買
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是“慢凍快融”,這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多用二甲基亞砜(DMSO)作為保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性;緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少冰晶對細(xì)胞的物理損傷。復(fù)蘇細(xì)胞采用快速融化的方法可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。血清完全細(xì)胞凍存液,通用于各種動物細(xì)胞株。特別配方有效提高細(xì)胞存活率和活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等污染,確保凍存細(xì)胞安全。適合用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。上海無血清細(xì)胞凍存液哪里買待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合。
無血清細(xì)胞凍存液是一種無血清細(xì)胞凍存液,通用于各種動物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長期保存(>5年)。CELLSAVING配方成分明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。細(xì)胞凍存液操作簡便,無需程序降溫,可在-80度或液氮中長期保存。相比于傳統(tǒng)凍存液,埃澤思生物推出的此款凍存液可以明顯增加細(xì)胞活力,穩(wěn)定保持細(xì)胞特性,以及細(xì)胞多能性,并且可以穩(wěn)定保持細(xì)胞的正常核型和增殖能力。細(xì)胞凍存液已經(jīng)經(jīng)過動物直接注射實(shí)驗(yàn)檢測,包括靜脈注射,皮下注射途徑,無明顯細(xì)胞毒性,動物安全性非常高。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):1、細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。2、復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。3、加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度無血清凍存液用途:無血清細(xì)胞凍存液用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲。
細(xì)胞凍存液的原理及配制方法:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。開蓋之前,用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。上海無血清細(xì)胞凍存液哪里買
在凍存細(xì)胞時(shí)將細(xì)胞懸浮于凍存液中,可使冰點(diǎn)降低,提高細(xì)胞膜對水的通透性。上海無血清細(xì)胞凍存液哪里買
無血清細(xì)胞凍存液的用途:無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無動物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,即取即用。凍存細(xì)胞,無需程序降溫。凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上。上海無血清細(xì)胞凍存液哪里買