無血清快速細胞凍存液凍存細胞復蘇方法：1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養基的試管中，混合均勻。3.離心收集培養細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4.清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細胞培養基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。6.鏡檢后，研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。無血清細胞凍存液的優勢：可培養板整板凍存，例如雜交瘤細胞凍存時可節省篩選過程。溫州正規無血清細胞凍存液

細胞凍存和復蘇的原則：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內冰晶的產生，從而使細胞產生內源性的機械損傷，引起細胞內環境滲透壓，PH，電解質等的改變，進而促使細胞死亡。細胞凍存液除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細胞培養液.細胞培養的傳代及日常維持過程中，在培養器具、培養液及各種準備工作方面都需大量的耗費，而且細胞一旦開始原代培養，它的各種生物特性都將逐漸發生變化并隨著傳代次數的增加和體外環境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；細胞儲存在液氮中，溫度達-196℃，理論上儲存時間是無限的。溫州正規無血清細胞凍存液降低細胞外溶液的電解質濃度，減少陽離子進入細胞的數量。

無血清細胞凍存液是一種無血清細胞凍存液，通用于各種動物細胞株（tumour細胞和常規細胞），凍存細胞可在-80℃長期保存（>5年）。CELLSAVING配方成分明確，不含動物來源性蛋白，不含血清，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全。細胞凍存液操作簡便，無需程序降溫，可在-80度或液氮中長期保存。相比于傳統凍存液，埃澤思生物推出的此款凍存液可以明顯增加細胞活力，穩定保持細胞特性，以及細胞多能性，并且可以穩定保持細胞的正常核型和增殖能力。細胞凍存液已經經過動物直接注射實驗檢測，包括靜脈注射，皮下注射途徑，無明顯細胞毒性，動物安全性非常高。

無血清細胞凍存液：解凍解凍后，應該立即鋪板在預先包被好的培養皿中。上述凍存的一管細胞可以成功的鋪板到6孔板的1-2孔。1.開始之前，提前準備好以下材料：試管，恢復至室溫的培養基，預先包被的培養板，確保整個解凍復蘇程序可以在較短的時間內完成。注意：不要在37°C水浴中加熱培養基。2.在37°C水浴中快速解凍，持續溫和的在水中晃動凍存管，直到剩余少量細胞還處于凍存狀態。3.水浴中取出凍存管，用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。4.用2mL的血清移液管把細胞懸液轉移到一個15mL的錐形試管。注意：用2mL的血清移液管代替1mL的頭可以減少細胞聚集體的分解。無血清凍存液注意事項：若需長期凍存細胞，請轉移至液氮罐中貯存。

無血清細胞凍存液：凍存注意：開蓋之前，用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。以下說明適用于在6孔板內的培養物的凍存。培養物應該在適合傳代的時候進行收集和凍存。每管所含有的細胞應當來源于6孔板的1個培養孔。如果使用其他的培養器皿，請相應的調整體積。1.在室溫（15-25°C）以300xg離心5分鐘。2.輕輕吸走上清液，注意不要擾動細胞團。3.用血清學吸管以1mL的TBD-698重懸細胞。在打散細胞團時，盡量減少細胞聚集體分解。4.用2mL的血清學吸管將1mL的細胞聚集體轉移到標記好的凍存管中。5.用以下方法凍存細胞聚集體:推薦使用緩速降溫方法，每分鐘降低1度，隨后可以在-196°C液氮長期保存。不推薦在-80°C長期保存。逐步降溫法：-20°C保存2個小時，然后-80°C中保存2個小時，隨后可以在-196°C液氮中長期保存。無血清細胞凍存液產品性能：細胞凍存是細胞實驗中的一個常規技術。溫州正規無血清細胞凍存液

不同的凍存方法替代了不同的凍存體系。溫州正規無血清細胞凍存液

無血清細胞凍存液：采用patent的凍存配方，用包括重組人血白蛋白等多種蛋白組分替代了血清的用途。用包括DMSO在內的復合凍存保護劑替代了單一的DMSO的保護作用。復合保護劑的內部保護劑，易于穿透細胞膜，避免在細胞凍存過程中細胞內部的水分子形成冰晶損傷細胞；外部保護劑，可在溶液形成冰晶之前，在細胞膜外部競爭性的結合細胞膜表面的水分子，從而降低細胞外溶液的電解質濃度，減少陽離子進入細胞的數量。在細胞內部與外部的協同保護作用下，明顯降低了溫度迅速下降與溫度上升對細胞的損害，因此大幅度提高了細胞經過凍存后的復蘇存活率。溫州正規無血清細胞凍存液