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濟南正規鼠尾膠原廠家供應

來源: 發布時間:2024年09月09日

鼠尾膠原,10mg包裝,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超純水至100ml,容量瓶配制比較準確。2.用吸管吸取10ml剛配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,吸十次不如加一次z準確),加入盛膠原的瓶中,輕輕顛倒,不要震蕩,蛋白容易起泡。幾分鐘即可,蛋白質非常好溶解。3.將膠原溶液移入事先壓好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大點的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,打到一檔就行,避免加入氣泡。然后4度過夜除菌。4.第二天將上層膠原溶液分裝進EP管中。用封口膜封口,4度保存,勿冷凍。當我們需要在培養瓶或培養皿內放置小玻片,制備細胞爬片時,可在瓶底涂一層膠原。濟南正規鼠尾膠原廠家供應

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鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:兩組培養皿中,隨著過氧化氫濃度的增高,均可見細胞凋亡狀態明顯加重,細胞存活率及細胞內過氧化氫活力明顯下降,細胞凋亡率及細胞內丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性。而在相同濃度過氧化氫誘導下,與對照組相比,實驗組細胞凋亡狀態明顯減弱,細胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高,細胞凋亡率和丙二醛水平明顯減低。表明鼠尾膠原對過氧化氫所致的心肌細胞氧化損傷具有保護作用,其機制可能與提高超氧化物歧化酶活力,減少丙二醛產生及提高Bcl-2的表達有關。寧波鼠尾膠原銷售廠家制備鼠尾膠原:將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡。

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鼠尾膠原使用方法:1、細胞培養器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例,用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應的培養器皿中,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺上過夜晾干,也可以在室溫放置1小時后,用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間。三維膠原凝膠的制備:A、無細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,加入690μL雙蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養液,混勻后立即加到培養器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要測定pH值)。將培養器皿在室溫放置20min待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。

含細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準備好懸浮于培養液的細胞,并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養液,混勻后立即加到培養器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要測定pH值)。加入760μL的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫放置20min待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養液,轉移到培養箱中培養。本品在室溫下pH中性時可迅速成膠,在操作過程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,切勿凍存,有效期一年。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經發現該方法會導致丟失蛋白。

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鼠尾Ⅰ型膠原:材料與方法:1.主要材料、試劑和儀器鼠尾、鹽酸、等滲氯化鈉溶液、鈣液、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司。日立高新TEMHT770(日本日立公司);多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈,用75%的乙醇浸泡5min。將尾巴剪開,去掉皮毛,并剪成小段,抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中,用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液,將肌鍵置于平皿中剪碎,按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃,將肌鍵分散于醋酸溶液中,4℃放置一周,然后以2186×g離心20min。在醋酸溶液的酸解下,肌腱水解成膠凍狀凝膠,置于冰箱4℃保存。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養模式的成功建立。開封正規鼠尾膠原哪家便宜

制備鼠尾膠原:按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液。濟南正規鼠尾膠原廠家供應

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養液的細胞,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul10×PBS或10×培養液,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養液,轉移到培養箱中培養。濟南正規鼠尾膠原廠家供應

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