RNA提取試劑的選擇：首先，要確定材料的可用性。盡管現有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分，但提取的材料仍需謹慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關鍵，但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時，使用Takara公司的樣品保護劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便，同時也可以有效解決組織、細胞樣品的短時間保存及運輸問題。此外，如果將不同時期收集的樣品都預先存放于本試劑中，可以做到立即終止并固定RNA表達的時序變化，減少實驗組間的誤差?？俁NA的產量可達30μg。產量可能因樣品類型而異。昆明正規RNA提取試劑哪家好

動物組織總RNA提?。?、盡量選取新鮮的組織，如果不是新鮮的（較好在三個月之內-80℃冰箱或者在液氮中凍存的。在剪取組織時，不要拿到室溫直接剪取，一定要放到冰盒上，盡量避免反復凍融。2、用干凈的剪刀鑷子剪取一小塊組織，剪取樣本時盡量剪組織中心的部位，或者先將大塊的組織先從中間切開，然后再在新鮮切口的位置剪取樣本。取下的組織要充分的剪碎，將剪碎的組織放到無RNA酶的EP管中，加入裂解液，剪碎的組織要充分接觸裂解液，準備勻漿。3、正常組織選取綠豆粒大小（30~60mg）的組織進行勻漿，如果組織中含有大量的蛋白、脂肪或者是緊密的纖維組織比如肝臟等，適當增減剪取組織的量（可選10~20mg）。4、如果提取的是魚肌肉，蝦肉，海蜇等含水分較多的組織時則應當適當提高樣本量用量（推薦100~200mg）。5、條件允許的情況下，動物組織使用高通道組織勻漿機勻漿后即可直接進行提取步驟，如沒有該設備。6、較后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上，以減少RNA的降解。杭州開封RNA提取試劑常用RNA提取方法有：1TRIzol法；2TRIzol+過柱法；3CTAB+過柱法；4試劑盒法。

酵母RNA的提取方法：稀堿法是屬化學破壁法，其方法是在一定堿濃度下，使構成細胞壁的蛋白質、脂肪及糖的化合物得到水解，從而破壞細胞壁，此法對堿的濃度及提取溫度要求比較嚴格，堿的濃度不可過濃，應控制在1％，并且對提取溫度也有一定的要求，提取時間短。因為在過分劇烈的條件下，容易使核糖核酸分子內的酯鍵斷裂，使核糖核酸降解而影響收得率。酵母菌作為重要的模式生物，是遺傳學和分子生物學的重要研究材料。由于酵母菌的細胞壁成分復雜，且較原核生物厚，難于破碎，因此酵母菌總RNA的抽提純化要比原核生物總RNA的抽提純化困難的多。如何有效地破碎細胞壁并保證RNA的完整性，是獲得高質量酵母菌總RNA的關鍵問題。總RNA的提取方法還有很多，如Trizol法、異硫氰酸胍法、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法、尿素法、十二烷基硫酸鈉(SDS)法、熱硼酸鹽法等，這些方法各有優缺點，不同的方法適用于不同類型的材料。

RNA提取：主要試劑Trizol是一種新型總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速破碎細胞，壓制細胞釋放出的核酸酶。1.Trizol試劑含有苯酚，具有毒性和刺激性，注重操作。2.RNase污染的主要來源是操作過程中手和空氣中的浮沉，注重配帶手套，樣品盡可能蓋嚴。3.細胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全會降低較后得率，因為一部分RNA會殘留在未裂解的細胞中。細胞裂解之后要看不見顆粒狀物質（結締組織和骨除外）。在清洗和裂解細胞時較好在低溫下操作，防止在操作過程中釋放的內源RNase降解了RNA。4.酵母和一些細菌由于細胞壁的特別結構，可以加入Trizol試劑同時加入無RNase的玻璃珠并劇烈振蕩，使細胞裂解充分。2-8℃避光保存一年。RNase主要來自樣品的細胞。

RNA提取試劑注意事項：1、需自備氯仿，異丙醇，DEPC，75%乙醇(DEPC水配制)，和DEPC水。2、所有離心管，泵頭及相關溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶，其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜，然后滅菌，烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中，處理過夜，滅菌即成DEPC水。3、使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些。因為在細胞或組織凍融過程中一些細胞或組織內的RNase會被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時抽提RNA，推薦先加入適量TRIReagent，并裂解樣品后凍存。在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成分。貴陽正規RNA提取試劑生產廠家

帶口罩、帽子，屏住呼吸、不說話，帶乳膠手套并要時常更換。昆明正規RNA提取試劑哪家好

RNA提取濃度不高或質量不佳原因及解決辦法：1、RNA降解：可能是提取樣本本身降解，或者是在提取過程中導致的降級；應當盡可能使用新鮮樣本進行RNA提取，采集的樣本應當及時置于液氮或者-80℃冰箱凍存，并減少反復凍融。在RNA提取過程中應當使用RNase/DNasefree的吸頭、離心管及其他材料，提取過程盡可能的快，提取后的RNA應置于冰盒上并及時放于-80凍存。如提取后的RNA需要進行凝膠電泳檢測，則應提取好后立刻進行電泳，電泳緩沖液應更換新配制的。2、鹽及有機溶劑殘留：提取試劑中含有酚及胍鹽，洗滌液中含有乙醇，在提取過程中裂解液吸棄不徹底，洗液沒有充分晾干導致的，殘留的鹽及有機溶劑對后續的逆轉錄和PCR均存在不同程度的壓制作用，因此在提取過程中應充分去除組織裂解液，洗滌時應充分，使管壁四周均能被洗滌到，另外管子空離和吹風是必須的步驟，會進一步降低有機物殘留。昆明正規RNA提取試劑哪家好