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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024年11月18日

膠原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu)。此法處理快速,所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的,適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備,但產(chǎn)品得率低,設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,得到高純度的膠原蛋白溶液。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌。開(kāi)封鼠尾膠原廠家

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一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,各種醫(yī)用耗材的更新?lián)Q代也是日新月異。止血材料是常見(jiàn)的醫(yī)療器械產(chǎn)品。但是現(xiàn)今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點(diǎn);同時(shí)還存在著容易與傷口粘附不易去除,導(dǎo)致傷口潰爛,或者因?yàn)檎掣綄?dǎo)致傳染;再次就是止血材料多是通過(guò)吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質(zhì)的材料來(lái)生產(chǎn)的。現(xiàn)今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素、α-氰基丙烯酸酯類組織膠、醫(yī)用止血明膠等,但是都有各自的缺點(diǎn)。如氧化纖維素可引起組織周圍PH值升高;α-氰基丙烯酸酯類組織膠降解過(guò)程中釋放出氰和甲醛等有毒物質(zhì);醫(yī)用止血明膠黏附性較差,易脫落,因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周圍組織等。重慶鼠尾膠原單價(jià)鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立。

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鼠尾Ⅰ型膠原:組裝液的配置:1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,倒入0.5mL自組裝液,室溫放置20min。予自組裝液自組裝24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中,將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中。然后將膠原經(jīng)去離子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL;滴加1mol/L的氯化氫,調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉),約16滴/min。

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調(diào)節(jié)pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時(shí),去除上清液,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂、陰離子交換樹(shù)脂進(jìn)行脫鹽處理;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時(shí),然后真空冷凍干燥,凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,滅菌、包裝,得到成品膠原蛋白粉末。利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。

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除了讓細(xì)胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長(zhǎng)環(huán)境,讓細(xì)胞在更真實(shí)地條件下進(jìn)行生長(zhǎng)。當(dāng)然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開(kāi)網(wǎng)站——知網(wǎng),輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。這類「耗子尾汁」通常用來(lái)鑒別耗子的基因型,對(duì)于轉(zhuǎn)基因小鼠而言,如果無(wú)法通過(guò)毛色來(lái)分辨動(dòng)物的基因型,往往會(huì)選用經(jīng)典的PCR法。將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡。正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家

制備鼠尾膠原:離心,4000轉(zhuǎn)/分,10-15分鐘。開(kāi)封鼠尾膠原廠家

生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,簡(jiǎn)化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過(guò)程中,進(jìn)行多次真空冷凍干燥,并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無(wú)菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫(yī)用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu)。開(kāi)封鼠尾膠原廠家

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