為了能夠從小鼠身上提取足夠的DNA，要從它們身上取下足量的細胞用于實驗。為了盡可能減少對動物的傷害和方便試驗人員的操作，剪下一小段鼠尾是一個不錯的選擇。就讓我們來盤點一下「耗子尾汁」的三種用法↓↓↓鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴、在小鼠尾靜脈上劃一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的「耗子尾汁」。它可以用于監(jiān)測小鼠血液成分的變化，確認小鼠是否患上了糖尿病或者某些能夠改變小鼠的血糖等。比起心臟和眼部取血，實驗用鼠尾尖取血的取血量較小，但取血之后，小鼠還能繼續(xù)下一步建?；蛘邔嶒?，完全沒有性命之憂。利用鼠尾Ⅰ型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料。太原正規(guī)鼠尾膠原供應商

膠原蛋白的提取方法：1.堿法提?。簤A法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等。如Holzer等[5]采用1%～1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。由于它容易造成肽鍵水解，因此得到的水解產(chǎn)物分子量比較低。所以，若想保留膠原的三股螺旋結構，此法不可取。2.鹽法提?。蝴}法提取膠原蛋白所用的中性鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化鈉、檸檬酸鹽等。在中性條件下，當鹽的濃度達到一定量時，膠原溶解。并且可采用不同濃度的氯化鈉對提取的膠原蛋白進行鹽析處理，可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。長沙鼠尾膠原廠家推薦可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細胞前用無菌的水漂洗。

要準備的器具：組織剪2把，有齒鑷1把，無齒鑷1把，200ml燒杯1個，培養(yǎng)皿1個，帶蓋廣口瓶1個，離心管、小瓶數(shù)個，滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1％醋酸溶液。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75％酒精溶液。取大鼠尾巴，洗凈，置75%酒精浸泡消毒后，手持尾巴，用止血鉗夾住尾巴較高，折斷尾骨后拉出尾腱，將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中，稱尾腱的重量，按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液，搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置48小時，離心。吸取其上清，分裝至小瓶，4℃保存。上述制備過程均在無菌條件下完成。

鼠尾膠原：含細胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞，并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要測定pH值）。加入760μL的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養(yǎng)液，轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。本品在室溫下pH中性時可迅速成膠，在操作過程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存，切勿凍存，有效期一年。在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹。

膠原蛋白的提取方法：酸法提?。核岱ㄌ崛≈饕捎玫碗x子濃度酸性條件浸漬處理原料，從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿，而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸，主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法，用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結構。此法處理快速，所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的，適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備，但產(chǎn)品得率低，設備腐蝕嚴重，污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白，得到高純度的膠原蛋白溶液。不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出。長沙鼠尾膠原廠家推薦

將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后，轉移到培養(yǎng)箱內。太原正規(guī)鼠尾膠原供應商

鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當?shù)墓切迯筒牧鲜侵魏霉侨睋p的中心環(huán)節(jié)。目前，臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中，人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機礦物材料[1-2]，由于不含自體骨組織中的有機大分子Ⅰ型膠原蛋白，其臨床療效遠遠低于自體骨組織。但是，自體骨移植和同種異體骨移植均來源于人類自身骨組織，數(shù)量有限，難以滿足臨床需要。因此，研發(fā)與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料，成為全世界骨組織工程學者孜孜以求的目標。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物，在分子結構上，羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板，呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙，沿著膠原纖維的長軸縱向礦化生長。本研究仿生天然骨組織的分子結構，酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原蛋白，重構形成Ⅰ型膠原纖維，然后將Ⅰ型膠原纖維放置在礦化液中模擬人體內骨生物礦化，通過透射電子顯微鏡(TEM)和電子衍射觀察羥基磷灰石鈣晶體在膠原纖維內部的骨生物礦化。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。太原正規(guī)鼠尾膠原供應商