將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內(nèi)加入預(yù)先準(zhǔn)備好的1.5 mL含有染料的反應(yīng)混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優(yōu)化選做:將樣品在室溫下多孵育30 min。 6. 上樣池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g離心15 min換液同時(shí)濃縮。 8. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管1,000×g離心回收標(biāo)記好的抗體。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì),滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達(dá)到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設(shè)計(jì)的死體積防止離干,保證樣品回收率和活性 超濾濃縮管批發(fā)價(jià)格是多少呢。靜安區(qū)默克4ml超濾濃縮管批發(fā)
蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過 20mg/ml。對于對濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白,建議的改進(jìn)方法是: 1)離心力降為推薦離心力的30%-50% 2)改用截留分子量更大的超濾管(如原本選用10k,此時(shí)可以選擇30k) 3)在濃縮過程中取出超濾管,用***頭反復(fù)吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現(xiàn)這種情況,請先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應(yīng)立即使用,如暫時(shí)不用,請保持潤濕狀態(tài),避免重新干燥。上海Merck離心濃縮管報(bào)價(jià)Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽!
7次低速離心,總耗時(shí)~100分鐘(含60分鐘孵育時(shí)間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(可選用50k MWCO型號)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。
加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時(shí)2,000×g離心4 min。 4. 使用一個(gè)新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時(shí)2,000×g離心4 min?;厥展苤屑醇兓玫牡鞍?。 6. 如果是純化抗體,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以延長結(jié)合反應(yīng)時(shí)間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時(shí)請使用目錄號ACS500024。上海超濾濃縮管哪家比較好?
操作模式 常規(guī)與切向流 : 常規(guī)溶液過濾(NFF)中液體在壓力或真空驅(qū)動下直接流 過膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上,小分子則通過膜流出。NFF 常 用于無菌過濾、澄清預(yù)過濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過濾(TFF) 液體流過時(shí)與膜表面呈一定角度,被膜阻擋的大顆粒物不會累積在膜表 面,而且還會被切向流從膜表面掃除,因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法,而現(xiàn)在,TFF 技術(shù)被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設(shè)計(jì)中,使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。超濾濃縮管服務(wù)電話是多少呢。楊浦區(qū)默克2ml超濾濃縮管聯(lián)系電話
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這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應(yīng)用兼容,常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進(jìn)行緩沖液置換。傳統(tǒng)透析方法需要時(shí)間很長,多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活,而且***還需要一步濃縮。新產(chǎn)品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新,需一步溫和的滲濾操作即可達(dá)到同時(shí)對樣品進(jìn)行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標(biāo)準(zhǔn) 操作步驟的優(yōu)化與簡化往往帶來更好的結(jié)果,數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性、可比性和高通量化隨之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創(chuàng)造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體,減少樣品轉(zhuǎn)移損失和人為操作的繁瑣和誤差,使蛋白樣品的處理更加標(biāo)準(zhǔn)化,數(shù)據(jù)結(jié)果便于評估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。靜安區(qū)默克4ml超濾濃縮管批發(fā)
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