Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理...
無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據樣品的粘稠程度,以及需要制備的目標外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa),以便達到更好的得率和操作體驗。 樣品體積大于 30mL 時可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管,請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內時吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進一步提高特定外泌體的純度,可選用包被相應抗體的磁珠進行親...
蛋白復性,溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理,采用溫和的透析方法可以避免其在過度濃縮時發生沉淀和離心操作剪切力對樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設計的透析管,**提高了樣品透析表面積,在2-5小時內即可完成透析,是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨特優點: 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質,增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會像使用夾子或打結那樣造成樣品滲漏和污染,安全可靠 旋蓋式設計,易于打開和關緊 硬管設計,易于更充分地吸取、移走樣品,即使是μL級樣品加樣方便,功能多樣 ? 采用標準***頭加樣,而非注射器和...
經典離心濃縮裝置 Amicon? Ultra 離心超濾管 反轉離心回收 ?反轉離心回收設計使蛋白樣品,特別是小體積樣品高效 回收,避免***頭吸取造成的樣品丟失或操作錯誤 ?0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設計為反轉回收模式 樣品吸附損失小 ?Ultracel? 超濾膜為密理博超濾產品特有的設 計,非特異吸附比較低,減少樣品的吸附損失 ?膜和聚丙烯管都是低吸附材質,保證> 90% 回收率 ?豎膜切向流設計,不像橫膜那樣容易堵,樣品 損失少 ?濃縮速度超快,**少需 10 分鐘你知道上海超濾濃縮管代理銷售哪家比較好嗎?虹口區默克0.5ml超濾濃縮管代理價用超...
外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備...
創新的純化 - 濃縮 - 換液一體化系統 Amicon? Pro 純化超濾系統 目前的蛋白純化常常包括很多步驟,用到多種器具,卻又因此帶來蛋白降解和損失的問題。為了避免因樣品轉移帶來的各種風險,減少您在樣品孵育、漂洗、洗脫、濃縮及換液各步上耗費的時間,默克密理博的研發團隊創新地推出了Amicon?Pro一體化純化超濾系統。Amicon?Pro提供了對小量蛋白樣品的標準化操作,使純化濃縮蛋白變得簡便高效,數據穩定易得。 開放的設計使您可以根據實際需要靈活使用,Amicon?Pro將成為實驗室小量蛋白純化、濃縮、換液各種操作的多功能工具。益啟生物公司主營超濾濃縮管銷售。黃浦區Merck離心濃...
蛋白親和純化(無需換液和濃縮) * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優化。 3次低速離心,總耗時~75分鐘(含60分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂(沉降的柱床體積)和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。(柱床)樹脂量≥ 500μL時采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*,其間可溫和攪動促進結合。超濾濃縮管批發價格是多少呢。青浦區...
如果能確保用同樣的超濾管對其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個目的蛋白的原因。有時蛋白會因其本身的一些特性(構象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級別的超濾管(如原本選用30k,此時可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請參考上面的關于蛋白沉淀問題的解釋。超濾濃縮管咨詢服務電話多少呢。上海超濾濃縮管哪家優惠操作模式 常規與切向流 : 常規溶液過濾(NFF)中液體在壓力或真空驅動下直接流 過膜。大的顆粒物被膜截留并堆積...
Amicon? Ultra超濾管的膜材質為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產工藝嚴格,截留分子量明確而精細,蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少? 按照經驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數量級(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關的測試,所以無法提供更進一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設計,不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用...
這種小管適合在1.5mL離心機中使用,其Ultracel?超濾膜對于蛋白及其它成分都表現出 極低的非特異性結合,連同醫藥級O型圈封閉設計,確保更少的樣品丟失,更穩定的數據結果。諸多考慮周到的精細設計使Microcon?成為比較好用的樣品制備工具之一。 特點與優點: 低吸附膜和反轉回收設計,即使是小體積、低濃度樣品得率也能達到95%以上 可以用產品自帶的1.5mL樣品收集管存儲濾過液和濃縮產物 濃縮倍數可達100X 操作簡便快捷,易于標準化。 Microcon? DNA Fast Flow 超濾管 專門設計用于從含有SDS的溶液中濃縮和回收基因組DNA。管子和膜均為低非特異性吸附...
截留 截留有時也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應會導致分子量相近 的分子表現非常不同的截留狀態。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強 度改變的情況下傾向于聚集或改變構象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,從而導致排阻增加。比如,有些蛋白質在某些緩沖液條件下 會發生多聚化,而另一些則發生解聚(如血紅素蛋白)成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復雜。以默克密理博的經驗,我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優先,再根據實際情況加以調整。益啟生物公司的超濾濃縮管系列有很多。松江區濃縮管代理商Millipore超濾濃縮管設有反轉離心回收設計使蛋白樣品,特...
提供的超濾管是沒有經過去內***處理的,同時由于內***通常以多聚體的形式存在,大小 在10-1000KD之間不等,在超濾的過程中是無法去除的。可在實驗前通過先用0.5M NaOH預清洗,隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內***。關于針對Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜,這種材質是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會增強,對于這種情況,可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra ...
7次低速離心,總耗時~100分鐘(含60分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(可選用50k MWCO型號)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入2...
加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時,可以延長結合反應時間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra ...
Millipore超濾濃縮管設有反轉離心回收設計使蛋白樣品,特別是小體積樣品回收,避免吸頭吸取造成的樣品丟失或操作錯誤; 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設計為反轉回收模式樣品吸附損失小; 合理的死體積設計,避免樣品離干而降低回收率; 能兼顧高回收率和操作的方便性及標準化,并滿足下游各種應用的要求,使研究者處理樣品時倍感輕松。 有效濃縮同時保證高的蛋白回收率 設計精巧、緊湊,一體化結構確保不會發生滲漏,即使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作。 根據您的具體需求選擇不同的超濾濃縮管設計。普陀區離心濃縮管一級代理操作模式 常規與切向流 : 常規溶液過濾(NFF)中液體在壓...
蛋白復性,溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理,采用溫和的透析方法可以避免其在過度濃縮時發生沉淀和離心操作剪切力對樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設計的透析管,**提高了樣品透析表面積,在2-5小時內即可完成透析,是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨特優點: 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質,增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會像使用夾子或打結那樣造成樣品滲漏和污染,安全可靠 旋蓋式設計,易于打開和關緊 硬管設計,易于更充分地吸取、移走樣品,即使是μL級樣品加樣方便,功能多樣 ? 采用標準***頭加樣,而非注射器和...
特別推薦應用(提供實驗報告作為參考) Microcon?超濾管: Microcon?PCR 級超濾管: ? 法醫鑒定分析的DNA樣品制備 ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 體外合成mRNA的純化 ? 以人mRNA或總RNA制備熒光DNA探針 ? 游離標記物的去除 ? 納克級核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 ? 替代乙醇沉淀,離心法高效濃縮基因組DNA 應用指南 典型應用 肽及生長因子濃縮 蛋白濃縮與脫鹽 電泳等操作前的蛋白樣品濃縮 HPLC前去除蛋白 組織培養抽提物和細胞裂解液中大分子成分的純化 生物樣本濃縮(抗原,抗體,酶等) 從含有SD...
上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規格可選)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優化。 用Protei...
外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾...
Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理...
外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備...
蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過 20mg/ml。對于對濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白,建議的改進方法是: 1)離心力降為推薦離心力的30%-50% 2)改用截留分子量更大的超濾管(如原本選用10k,此時可以選擇30k) 3)在濃縮過程中取出超濾管,用***頭反復吹吸幾次后再繼續濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現這種情況,請先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應立即使用,如暫時不用,請保持潤濕狀態,避免重新干燥。你知道超濾濃縮管的用途嗎?上海默克超濾...
默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設計 一經推出即成為生物樣品操作的行業頭牌產品。不論是蛋白、 核酸、***或顆粒物,抑或低濃度樣品或寶貴的活性樣品, Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標準 化,并滿足下游各種應用的要求,使研究者處理樣品時倍感輕 松。 Amicon? Ultra 超濾管的獨特優點: 有效濃縮同時保證比較高的蛋白回收率 合理的死體積設計 ?避免樣品離干而降低回收率 ?便于估計和控制樣品濃縮倍數 ?重復性好,便于樣品數據相互比較Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽!上海Merck超濾濃縮管...
基于 Millipore? 先進的膜過濾技術,默克密理博開發了獨特的腺***及慢***純化與濃縮試劑盒。試劑盒中已經包括了必需的 Steriflip? 過濾裝置和超濾管,能在短短 2 小時內安全、快捷地獲得高產***。 節約時間:整個操作需 2 小時。 產量高:***回收率超過 70%。 整體體驗極好:流程簡便而***質量高。 設計新穎易操作:Steriflip? 過濾裝置可以替代昂貴的設備,使原本繁瑣凌亂的操作變得簡單而標準。 安全:封閉的真空抽濾設計,完全避免樣品飛濺造 成的***污染和損失。買超濾濃縮管找益啟生物公司。松江區默克離心濃縮管代理價默克密理博 Amicon? Ul...
Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理...
特點與優點: 高產:沒有樣品轉移,損失更少 溫和:特別的滲濾設計使換液過程更溫和 快速:從細胞裂解到純化、優化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優化。應該考慮為特定蛋白選擇相應的工具進行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液上海Millipore超濾濃縮管授權代理商!普陀區默克2ml超濾濃縮管一級代理用于攪拌式超濾...
特點與優點: 高產:沒有樣品轉移,損失更少 溫和:特別的滲濾設計使換液過程更溫和 快速:從細胞裂解到純化、優化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優化。應該考慮為特定蛋白選擇相應的工具進行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液超濾濃縮管咨詢服務電話多少呢。崇明區默克0.5ml超濾濃縮管訂購Amicon? Ultra超...
將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內加入預先準備好的1.5 mL含有染料的反應混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優化選做:將樣品在室溫下多孵育30 min。 6. 上樣池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g離心15 min換液同時濃縮。 8. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管1,000×g離心回收標記好的抗體。 特點與優點: 特別的反轉離心回收設計,滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數達到50-20...
通量(超濾效率)及其影響因素 超濾過程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積,使用高 NMWL 濾膜可以增加通量,但同時 會降低回收率。選擇膜和裝置時需要同時考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多,包括: 壓力:較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進行超濾時,流量隨著跨膜壓力 (TMP)的增大而增加。正壓條件下操作,如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯, 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***,通量會達到一個平臺,甚 至可能隨著壓力的增加而降低。上海超濾濃縮管銷售公司電話多少?長寧區Merck超濾濃縮管參數特點與優點: 特...
特別推薦應用(提供實驗報告作為參考) Microcon?超濾管: Microcon?PCR 級超濾管: ? 法醫鑒定分析的DNA樣品制備 ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 體外合成mRNA的純化 ? 以人mRNA或總RNA制備熒光DNA探針 ? 游離標記物的去除 ? 納克級核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 ? 替代乙醇沉淀,離心法高效濃縮基因組DNA 應用指南 典型應用 肽及生長因子濃縮 蛋白濃縮與脫鹽 電泳等操作前的蛋白樣品濃縮 HPLC前去除蛋白 組織培養抽提物和細胞裂解液中大分子成分的純化 生物樣本濃縮(抗原,抗體,酶等) 從含有SD...