培養基配置原則:滅菌處理,要獲得微生物純培養,必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養基而言,更是要進行嚴格的滅菌。對培養基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質遭到破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進行滅菌,某些對糖類要求較高的培養基,可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合;長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產生沉淀。培養基制備器功能強大的加熱器,能夠迅速加熱!河北培養基制備器廠家
培養基制備的基本方法和注意事項:1.培養基配方的選定同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外.一般均應盡量收集有關資料.加以比較核對.再依據自己的使用目的加以選用,記錄其來源。2.培養基的制備記錄每次制備培養基均應有記錄,包括培養推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。較終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。河北培養基制備器哪家好全自動培養基制備儀主要特點:具有快速升溫和迅速冷卻功能!
培養基防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。
制備培養基有什么要求:1、培養基需保持澄清,便于觀察細菌的生長情況,培養基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉淀物,必要時可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質而影響透明度。2、盛裝培養基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質玻璃容器為好。3、培養基的滅菌既要達到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營養價值,121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質的培養基如糖類、血清、明膠等,則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、克菌素等,待基礎瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。頻繁報錯建議導出日志進行專業診斷。
培養基的脫氣:必要時,在使用前將養基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時松開容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。3.添加成分的加入:對熱不穩定的添加成分應在培養基冷卻至47℃~50℃時加入,滅菌的添加成分加入前應冷卻至室溫,避免冷的液體會造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養基的棄置:所有污染和未使用的培養基的棄置應采用安全的方式,并符合相關法律法規的規定。每批培養基應另外分裝20ml培養基于一小玻璃瓶中,隨該批培養基同時滅菌,以為測定該批培養基較終pH之用。程序化滅菌曲線優化能量利用,減少資源浪費。 整合攪拌系統確保瓊脂等膠體物質均勻分布。北京不銹鋼內桶培養基制備器
在選購培養基制備器時,快速加熱和冷卻能力是重要考量因素,直接影響培養基的質量、實驗效率及操作便利性。河北培養基制備器廠家
倒平板:滅菌溶化的培養基冷卻到50℃左右后,倒入無菌干燥的培養皿中。培養基的溫度不能過高,否則容易在培養皿的內蓋上形成太多的冷凝水;溫度太低,培養基又容易凝固成塊,無法制成平板。倒平板時,應在靠近酒精燈火焰進行,以免外界的雜菌落入平板內,左手拿培養皿,右手拿三角瓶的底部,用左手的小指和手掌部位把三角瓶的棉塞拔下,灼燒瓶口,用大拇指和食指把培養皿蓋打開一條縫,至瓶口剛好伸入,倒入培養基,以鋪滿底為限,不超過培養皿高度的三分之一,迅速蓋好蓋,放在桌面上,輕輕地轉動培養皿,使培養基分布均勻,冷凝后即可。河北培養基制備器廠家