培養基:是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環境。培養基的種類:培養基種類很多,根據配制原料的來源可分為自然培養基、合成培養基、半合成培養基;根據物理狀態可分為固體培養基、液體培養基、半固體培養基;根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑒別培養基等;根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、菌培養基等。選購時需結合樣本量、成分敏感性及預算,優先選擇控溫精確、升/降溫速度快且具備無菌保護設計的設備。大容量 培養基制備器
液體培養基:為確定液體培養基的生長率,應接種適當的培養物。下面介紹的是用定量、半定量和定性方法評估生長率和選擇性的方法。所推薦的這些方法都是通過將液體培養基以傾注或劃線方式接種到瓊脂平板上培養后,計數或計算液體培養基分數而得出其生長數量的。對于液體培養基定性測試方法,則通過肉眼觀察來實現。目標菌和非目標菌的定量稀釋法步驟如下:選擇液體培養基10mL/管待檢。接種目標菌:將少量測試菌株培養物(每管10CFU~100CFU)接種測試肉湯和標準肉湯,混勻。接種非目標菌:將大量測試菌株培養物(每管大于1000CFU)接種測試肉湯和標準肉湯,混勻。福建實驗室培養基制備器加熱板溫度不穩應校準溫控器或更換傳感器。
培養基配制--稱量:培養基的制備環節,應當嚴格按照培養基配方制備,在培養基的稱量過程中,建議在干爽、無風的區域或者通風柜中進行,這樣能夠避免培養基吸潮使稱量結果不準。應當選擇靈敏度較高的稱重天平,這樣能夠保證稱量的準確性,同時稱量過程中要選擇的稱量匙,避免其他雜質混入培養基中。操作人員應當對稱量過程進行詳細的記錄,記錄中應該體現培養基名稱、批號、稱量數量、具體配制方法、制備人姓名日期、復核人姓名日期等信息,方便后期的溯源調查。
培養基防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、病菌及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中,可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養,48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區與無毒區嚴格分開,并有各自自立的空氣凈化系統及孵室,有毒區對無毒區應保持相對負壓,防止病毒對培養細胞(尤其是細胞庫)的污染。需具備±1°C以內的精確控溫,避免溫度波動影響滅菌效果或成分穩定性。
天然培養基中血清主要作用:提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。快速滅菌程序可在30分鐘內完成標準培養基處理。 支持固體、液體及半固體培養基的一體化制備。廣西不銹鋼內桶培養基制備器
顯示屏閃爍可嘗試重置系統或更新固件。大容量 培養基制備器
物理分類:液體培養基,80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養成分的培養基。固體培養基,一類配制成的固體狀態的基質。根據性質又分為固化培養基、非可逆性固化培養基、天然固態培養基、濾膜。半固體培養基,指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態的培養基。脫水培養基,又稱預制干燥培養基,指含有除水分外的一切成分的商品培養基。微生物分類;選擇性培養基:一類根據某微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優勢菌的功能,較廣用于菌種篩選等領域。鑒別培養基:一類在成分中加有能與目的菌的無色代謝產物發生顯色反應的指示劑,從而達到只須用肉眼辨別顏色就能方便的從近似菌落中找出目的菌菌落的培養基。大容量 培養基制備器