HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項：多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸，使溶液pH降低，從而影響染色。不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。多聚甲醛雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時。多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中，固定完成后用適當的洗滌液或水沖洗數小時仍會有殘留，因此后續實驗結果如果受醛基影響，須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續操作。HE染色規范化流程及注意事項？黑龍江靠譜的HE染色報告

HE染色等常規染色，組化或是熒光優先推薦做石蠟切片。原因：石蠟切片對組織的形態保存比冰凍切片好，并且對抗原基本無影響。脂質染色（油紅O染**odipy染色，尼羅紅染色）必須做冰凍切片，不能做石蠟切片。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片：ROS染**-半乳糖甘酶染色，ATP染色，膽固醇染色。如果標本已經放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片，將標本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內固定（在固定液內邊解凍邊固定）。組織形態結構保存完好順序：新鮮組織立即投入固定液內固定石蠟切片＞組織-80°冷凍后投入固定液內固定石蠟切片＞新鮮組織立即投入固定液內固定冰凍切片＞組織-80°冷凍后直接冰凍切片。浙江病理HE染色報告HE染色，南京英瀚斯，專業的實驗外包公司。

HE染色分化作用：染色后，用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去，這個過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木精的醌型結構，使組織與色素分離而褪色。經蘇木精染色后，必須用0.5%鹽酸乙醇分化，使細胞核過多結合的蘇木精染料和細胞漿吸附的蘇木精染料脫去，在進行伊紅染色，才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。因此，在HE染色中分化是極為關鍵的一步。返藍作用：分化之后，蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態，呈紅色，在堿性條件下處于藍色離子狀態，呈藍色。組織切片經0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色，故分化之后，立即用水出去組織切片上的酸而終止分化，再用弱堿性水（0.2%氨水）使蘇木精染上的細胞核呈現藍色，這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍，但所需時間較長。

HE 染色是病理的主要常規染色，其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y，藉由電荷與吸附性的差異，組織結構對不同染料的結合程度不同，我們可以發現Hematoxylin呈色在細胞核，Eosin Y則表現在細胞質與間質，染色優良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細胞型態與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異，而且每個實驗室需要的顏色深淺不一，使用者可以依自己的需求另行調整，以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟海馬組織HE染色如何觀察。

HE染色結果判讀：細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色，軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色，粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細胞的種類有關，也隨其生活周期及病理變化而改變。例如，細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當其衰老時或發生退行性變則呈現嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現透明變性時，伊紅著色由淺變深。H-E染色評定標準：（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均勻，無皺褶無刀痕；（2）染色核漿分明，紅藍適度，透明潔凈，封裱美觀。HE染色 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一。靠譜的HE染色價格

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HE染色細胞質過染分析及應對原因：（1）伊紅染色液濃度太高，特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在；（2）切片在伊紅染色時間過長；（3）切片在伊紅染色后經乙醇脫水步驟時過的太快，而使乙醇分化伊紅的作用不能產生。對策：適當稀釋伊紅染色液，減少伊紅染色時間，或者使切片在乙醇脫水等步驟時，停留時間相對均勻。同樣，也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現藍黑色沉淀物分析及應對原因：蘇木精染色液中的金屬膜，黏附在玻片上。對策：每天染色前仔細過濾蘇木精染色液，或建議使用半氧化蘇木精染色液，如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產生。黑龍江靠譜的HE染色報告