HE染色法的話,不能準(zhǔn)確說出細(xì)胞器的顏色,實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色,胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色?;蛘咴敿?xì)說明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。比較常見的病理染色HE染色?廣東病理HE染色
HE染色構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多,它們有不同的等電點(diǎn)。在普通染色法中,染色液的酸堿度為pH6左右,細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,pH值升高時(shí),則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性;pH值降低時(shí),原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝?。所以說染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng)。吉林推薦的HE染色多少錢HE染色,即是蘇木精-伊紅染色法,是形態(tài)學(xué)比較常用的染色方法。
HE染色注意事項(xiàng):1.組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,否則無論進(jìn)行那種染色都會發(fā)生困難。脫蠟時(shí)間要充分,若溶蠟劑使用過久應(yīng)及時(shí)更換以免效率降低,若室溫過低,可將溶蠟劑置于溫箱中進(jìn)行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時(shí)間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物,這可能是液體表面的過氧化物,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后,著色力會減弱,著色不鮮艷,呈灰藍(lán)色時(shí)應(yīng)及時(shí)更換新液。 3.染色的時(shí)間長短需依據(jù):染劑對組織的染色作用,室溫條件,切片厚薄,固定液的類別,染液的新舊而進(jìn)行調(diào)節(jié)。所以在染色時(shí)必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時(shí)間。 4.分化十分重要。分化步驟的準(zhǔn)確也是染色成敗的關(guān)鍵,若分化失當(dāng)則必然引起染色不勻或過淡,過深等現(xiàn)象,因此分化后一定要鏡檢,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色。否則需再次分化,不然一旦復(fù)染后,組織會呈紫藍(lán)色即“藍(lán)蓋紅”現(xiàn)象。 5.還原液不宜過濃,若堿性太強(qiáng)易使組織脫落故以淡為宜。 6.伊紅宜淡染,復(fù)染過深胞核會不清晰,影響鏡檢。
HE染色伊紅著色淡分析及應(yīng)對原因:(1)伊紅染液的pH值可能大于5;(2)藍(lán)化液殘留過多;(3)切片太?。唬?)切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時(shí)間過長。對策:檢查伊紅染液的pH值,如果必要的話,用乙酸將其調(diào)節(jié)在4~5之間,從而使伊紅染色彩艷麗。確保每次藍(lán)化步驟完成后,使用的弱堿性溶液被充分洗去,玻片上沒有殘留的弱堿性溶液。檢查切片的厚度。脫水時(shí)不要讓切片在低濃度乙醇停留時(shí)間過長,因?yàn)楹嗟牡蜐舛纫掖紩⒁良t的顏色分化掉。腎臟組織HE染色如何觀察。
HE染色主要是為通細(xì)胞及胞核形態(tài)、大小來區(qū)別各種細(xì)胞的,并不是直接通過顏色來區(qū)分的蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色.炎性細(xì)胞一類人體內(nèi)的免疫細(xì)胞,包括中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞.淋巴細(xì)胞是**容易和其它幾種細(xì)胞區(qū)分的,細(xì)胞小而圓,核漿比很大,核濃染成深藍(lán)紫色.漿細(xì)胞大小介于淋巴細(xì)胞和巨噬/多核/巨細(xì)胞之間,胞漿略嗜堿,核偏位,核染色深,高倍鏡下可見核呈車輪狀.多核細(xì)胞和巨細(xì)胞的概念是不是有點(diǎn)重疊,多核細(xì)胞故名思意是有多個核的大型細(xì)胞,如朗漢氏巨細(xì)胞,常在肺結(jié)核的干酪樣壞死灶周圍出現(xiàn),多個核排成一圈,異物巨細(xì)胞也是有許多個核的體積巨大的細(xì)胞,這兩種巨細(xì)胞胞質(zhì)都偏酸.巨噬細(xì)胞似乎在不同的組織中有不同的名稱.HE染色(脫蠟、水化、染色、脫水、封片) - 實(shí)驗(yàn)方法。江蘇性價(jià)比高的HE染色分析
關(guān)于HE染色,你不知道的實(shí)驗(yàn)技巧。廣東病理HE染色
HE染色常見問題:Q3:細(xì)胞核染色過淺,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,或蘇木素過度氧化失效,或分化時(shí)間太長。對策:重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液,每個3-5min即可,接著重新染色。可以適當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來水沖洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,自來水沖洗10min染色。Q4:細(xì)胞核染色過深,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過長;或切片太厚;或分化時(shí)間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。廣東病理HE染色