用于掃描電鏡觀察微觀形貌的生物樣品類別多種多樣,如植物、昆蟲、細胞組織、 病理組織和細菌病毒等。生物樣品要獲得清晰真實的掃描電鏡圖像,需要解決樣品失水 變形和圖像放電的問題。掃描電鏡樣品倉都是處于一定的真空狀態下,未經處理的含水 生物樣品容易因水分揮發出現表面結構變形,用于掃描電鏡觀察微觀形貌的生物樣品類別多種多樣,如植物、昆蟲、細胞組織、 病理組織和細菌病毒等。生物樣品要獲得清晰真實的掃描電鏡圖像,需要解決樣品失水 變形和圖像放電的問題。掃描電鏡樣品倉都是處于一定的真空狀態下,未經處理的含水 生物樣品容易因水分揮發出現表面結構變形掃描電子顯微鏡由三大部分組成:真空系統,電子束系統以及成像系統。四川組織掃描電鏡服務
掃描電鏡雖然是顯微鏡家族中的后起之秀,但由于其本身具有許多獨特的優點,發展速度是很快的。 1 儀器分辨率較高,通過二次電子像能夠觀察試樣表面6nm左右的細節,采用LaB6電子器,可以進一步提高到3nm。 2 儀器放大倍數變化范圍大,且能連續可調。因此可以根據需要選擇大小不同的視場進行觀察,同時在高放大倍數下也可獲得一般透射電鏡較難達到的高亮度的清晰圖像。 3 觀察樣品的景深大,視場大,圖像富有立體感,可直接觀察起伏較大的粗糙表面和試樣凹凸不平的金屬斷口象等,使人具有親臨微觀世界現場之感。四川組織掃描電鏡服務掃描電鏡樣品可以在樣品室中作三度空間的平移和旋轉,因此,可以從各種角度對樣品進行觀察。
掃描電子顯微鏡是一種多功能的儀器,具有很多優越的性能,是用途較為為普遍的一種儀器,它可以觀察納米材料。所謂納米材料就是指組成材料的顆粒或微晶尺寸在0.1~100 nm范圍內,在保持表面潔凈的條件下加壓成型而得到的固體材料。納米材料具有許多與晶態、非晶態不同的、獨特的物理化學性質。納米材料有著廣闊的發展前景,將成為未來材料研究的重點方向。掃描電子顯微鏡的一個重要特點就是具有很高的分辨率,現已普遍用于觀察納米材料。
1)植物學 科學界用掃描電鏡對植物的根、莖、葉等組織進行解剖學研究,并且能夠對細胞核、葉綠體等微小的細胞結構進行動態觀察,從超微形態學角度闡明了葉片衰老時細胞 核、葉綠體的動態變化特征,研究葉片衰老機理和規律,可用于延緩小麥等植物葉片衰老。 2)動物學 應用掃描電鏡技術研究動物的超微形態結構,對其分類學、生理學,病理學等基礎學科以及資源利用、動植物蟲害防治等具有重要意義。比如,應用掃描電鏡研究各種 動物毛纖維的形態,如鱗片的形狀,高度,厚度、排列規律邊緣形態,表面光滑程度、張角大小,覆蓋密度等指標,可以用于進出口織品質量的鑒定、紡織晶加工工藝 的改進、原料的合理利用、動物種屬的鑒別、刑事破等方面。英瀚掃描電鏡可用于觀察動物:大腸、絨毛、細胞、纖維等。
掃描電鏡細胞內部結構冷凍割斷法 該方法簡便,結構清晰,已得到普遍應用。其操作方法如下: 1) 取材和固定:為了使細胞結構清晰,不被過多的血細胞污染,可在取材前用灌注法沖洗。即先將動物麻醉,經腹主動脈注入生理鹽水或低分子量的右,切開下腔靜脈放血,至無血色為止。然后迅速取材,將樣品修成1mm×1mm×5mm大小,投入1%鋨酸溶液中固定1小時,用1/15M磷酸緩沖液(pH7.4)清洗兩次,每次10分鐘。 2) 二甲基亞砜浸泡:將樣品依次放入25%、50%二甲基亞砜溶液中,各浸泡30分鐘。 3) 割斷:用TF—1型冷凍割斷裝置進行割斷。然后將割斷后的樣品放到50%二甲基亞砜中,等融化后再用1/15M磷酸緩沖液浸洗,每次10分鐘,換液5次。 4) 軟化及后固定:將樣品放入0.1%鋨酸中軟化,溫度20℃,時間48~72小時。然后用1%鋨酸固定1小時,雙蒸水浸洗1小時,換液幾次,需徹底清洗干凈。 5) 導電染色:將樣品放入2%丹寧酸中2小時(或過夜),以雙蒸水清洗1小時,換液幾次。雙蒸水清洗1小時。 6) 脫水、干燥及鍍膜:按常規方法進行。由于掃描電鏡入射電子與樣品之間的相互作用,各個方向發射的二次電子收集起來。四川組織掃描電鏡服務
掃描電鏡不用于創建圖像的光,因為它形成造成的照片是在黑色和白色。四川組織掃描電鏡服務
掃描電鏡操作基本步驟 1 、取材 掃描電鏡下觀察的樣品尺寸要求比較寬松,一般1cm3左右樣品都能適合大多數掃描電鏡觀察。 2 、固定 鋪片培養的細胞取出浸入 PBS 中,漂洗細胞表面。然后將細胞鋪片放入青霉素小瓶中,加 4 ℃ 預冷的 3% 戊二醛,在 4 ℃ 固定 2h 或過夜,吸出固定劑,用 PBS 浸洗 2 次,每次 10min ,再用 4 ℃ 預冷的 1% 鋨酸。在 4 ℃ 固定 1h ,然后用 PBS 浸洗 2 次,每次 10min 。 3 、脫水 acetone / 醋酸異戊酯( 1 : 1 )脫水 10min ,接下來醋酸異戊酯脫水 30min ,或用系列梯度酒精( 30% 、 50% 、 70% 、 80% 、 90% 、 95% 、 100% )脫水,每種濃度酒精通過 2 次,每次 15min 。 四川組織掃描電鏡服務
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