培養基制備的基本方法和注意事項:1、培養基各成份的混合和溶化培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸2、培養基pH的初步調正因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行PH的初步調正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的好終PH,保證培養基的質量。PH調整后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。3、培養基的過濾澄清液體培養基必須較全澄清,瓊脂培養基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。培養基制備器都是微處理器控制的,而且滅菌之后保持的溫度是可以預設的。中國澳門培養基制備器哪家好
培養基的制備:(1)稱量:根據培養基的配方,稱取適量藥品于搪瓷杯中;(2)溶解:用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;(3)分裝:根據不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長的1/5(需根據試管的大小而定).液體培養基如乳糖膽鹽發酵培養基約分裝10毫升左右.(4)塞硅膠塞:裝好培養基的試管應塞上硅膠塞,松緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內,這樣即可過濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養基水分的蒸發.(5)包裝:三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包扎,試管集中于試管簍.2、無菌水的制備:(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水(稀釋水)裝入試管中.(2)用100ml量筒量取95ml蒸餾水(稀釋水)裝入150ml的三角瓶中.可置少許玻璃珠于三角瓶內,防止暴沸.(3)量取240ml蒸餾水(稀釋水)于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包扎好,高壓滅菌備用。中國澳門培養基制備器哪家好培養基制備器開始運行樣品量配器并根據培養基的黏度調整樣品劑量。
分裝:配制好的培養基根據不同的用途分裝在三角瓶、試管等容器中,分裝試管,如果試管量很大,可用自動分液器。如果試管量少,可用漏斗分裝。分裝量不超過容器容積的三分之二。三角瓶以不超過容積的二分之一為宜;瓊脂斜面以不超過試管長度的五分之一為宜,滅菌后,擺成的斜面為培養基的三分之一、底層為三分之二的量為宜;半固體瓊脂分裝量為試管長度的的三分之一;用來接種或保菌的高層瓊脂,分裝量為試管長度的四分之一或三分之一,用來接種厭氧菌的要達到三分之二;瓊脂平板,內徑90mm的以13ml~15ml為宜,內徑70mm的平板為8ml~10ml,制成的瓊脂平板。
培養基:是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養物質組合配制而成的營養基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養基既是提供細胞營養和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環境。培養基的種類:培養基種類很多,根據配制原料的來源可分為自然培養基、合成培養基、半合成培養基;根據物理狀態可分為固體培養基、液體培養基、半固體培養基;根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑒別培養基等;根據使用范圍可分為細菌培養基、放線菌培養基、酵母菌培養基、菌培養基等。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。
培養基配置原則:營養物質濃度及配比合適,培養基中營養物質濃度合適時微生物才能生長良好,營養物質濃度過低時不能滿足微生物正常生長所需,濃度過高時則可能對微生物生長起抑制作用,例如高濃度糖類物質、無機鹽、重金屬離子等不但不能維持和促進微生物的生長,反而起到抑菌或殺菌作用。另外,培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講,碳氮比指培養基中碳元素與氮元素的物質的量比值,有時也指培養基中還原糖與粗蛋白之比。例如,在利用微生物發酵生產谷氨酸的過程中,培養基碳氮比為4/1時,菌體大量繁殖,谷氨酸積累少;當培養基碳氮比為3/1時,菌體繁殖受到抑制,谷氨酸產量則大量增加。再如,在發酵生產過程中,可以通過控制培養基中有效氮(或碳)源與遲效氮(或碳)源之間的比例來控制菌體生長與的合成協調。組合培養基是一類按微生物的營養要求精確設計后用多種高純化學試劑配制成的培養基。中國澳門培養基制備器哪家好
低滲溶液則使細胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養基時要掌握營養物質的濃度。中國澳門培養基制備器哪家好
培養基的購置:從培養基自身的質量來看,不同生產廠家的產品,甚至同一廠家不同批號的產品都會存在差異。對培養基的供應企業進行評價后選擇合格的供應商,這是培養基購買過程中重要的步驟。應選擇產品市場信譽度高、有質量保證能力和服務保證能力的企業;企業是否通過了質量管理體系的認證是較為客觀的評價指標。要求生產企業提供:培養基成分名稱及產品編號、批號、使用前的pH、儲藏信息和有效期、性能評價和所用測試菌株、技術數據清單、質控證書以及必要的安全/危害數據等材料。中國澳門培養基制備器哪家好