培養基制備器:培養基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個步驟:用水、稱量、溶解復水、滅菌、pH測定、保存。1、必須選用專門純凈水或者經消毒過后的無菌水。2、培養基進行復水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養基中,影響微生物的生長。3、容器的體積須大于復水后培養基總體積的2倍,預防出現溢出情況。4、在對培養基進行加熱時,若培養基內含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時間。加熱的過程中不斷進行攪拌防止出現培養基結底炭化從而造成成分損害。部分培養基則需要使用沸水進行加熱,預防發生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養基進行再融化時應使用沸水浴或流動蒸汽進行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養基應棄去。6、而當對培養基實施滅菌時,需嚴格按照說明規范操作。但是也不能盲目按照說明的時間進行,需結合實際情況,合理調節滅菌時間,防止出現培養基滅菌過度而造成的成分變性。自動培養基制備器可以快速的準備好滅菌,放入滅菌鍋。山西培養基滅菌 培養基制備器
培養基的類型-根據培養基的物理狀態來區分,可以分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基。1)液體培養基所配制的培養基是液態的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養基營養成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態。2)固體培養基在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養基在實際中用得十分多方面。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。3)半固體培養基如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中,就制成了半固體培養基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。山西培養基滅菌 培養基制備器培養基制備器培養基分裝機**系統,程度上方便用戶的使用。
常用培養基的制備及注意事項一、實驗目的了解培養基的配制原理;掌握配制培養基的一般方法和步驟;了解常見滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。二、實驗原理培養基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產物所需要的營養物質的混合物。培養基的原材料可分為碳源、氮源、無機鹽、生長因素和水。根據微生物的種類和實驗目的不同,培養基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養基是一種應用較普遍和較普通的細菌基礎培養基,有時又稱為普通培養基。由于這種培養基中含有一般細胞生長繁殖所需要的較基本的營養物質,所以可供微生物生長繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質變性從而達到殺死微生物的效果。
培養基的分裝:大批量配制時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前后,均要對分配器的管道系統進行沖洗,在分裝無菌培養基前,則要采用無菌硅膠管。固體培養基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌后根據需要分裝平皿或試管。平皿:傾注平皿,應在無菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發。斜面:制備低層斜面分裝于試管,約占容積1/5,滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養基,如沾有培養基應用布抹去,以避免污染。在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養基時,常需在培養基中加入少量螯合劑。
天然培養基的血清種類:牛血清分為小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質很高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分很少。血清的主要成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。培養基制備器放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。山西培養基滅菌 培養基制備器
培養基長時間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖。山西培養基滅菌 培養基制備器
制備培養基有什么要求:1、培養基需保持澄清,便于觀察細菌的生長情況,培養基加熱煮沸后,可用脫脂棉花或絨布過濾,以除去沉淀物,必要時可用雞蛋白澄清處理,所用瓊脂條要預先洗凈晾干后使用,避免因瓊脂含雜質而影響透明度。2、盛裝培養基不宜用鐵、銅等容器,使用洗凈的中性硬質玻璃容器為好。3、培養基的滅菌既要達到完全滅菌目的,又要注意不因加熱而降低其營養價值,121℃15min即可,如為含有不耐高熱物質的培養基如糖類、血清、明膠等,則應采用低溫滅菌或間歇法滅菌,一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、克菌素等,待基礎瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。山西培養基滅菌 培養基制備器