固體斜面培養基配制步驟:1、培養基配方的選定同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養基的制備記錄:每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,較終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。3、培養基成分的稱取:培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂,較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側,每稱完一種成分即在配方面軍做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。培養基的實驗室制備:正確制備培養基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。湖北培養基制備器安裝調試
培養基的滅菌:一般培養基可采用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養基制備方法中,如無特殊規定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應另行配成20%如或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術、定量加于培養基。明膠培養基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和物品等則應從無菌操作技術抽取和加入于經冷卻約50℃左右的培養基中。瓊脂斜面培養基應在滅菌后立即取出、待冷至55-60℃時,擺置成適當斜面、待其自然凝固。湖北培養基制備器安裝調試控制培養基的條件,控制培養基的pH 配制培養基必須根據微生物的特點調節pH。
根據培養基的用途來區分,可分為選擇培養基、增殖培養基、鑒別培養基等。1)選擇培養基在培養基中加入某種物質以殺死或克制不需要的菌種生長的培養基,稱之為選擇培養基。如鏈霉素、氯霉素等克制原核微生物的生長;而制霉菌素、灰黃霉素等能克制真核微生物的生長;結晶紫能克制革蘭氏陽性細菌的生長等。2)增殖培養基在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養物質,以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養基稱為增殖培養基,這種培養基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養基也是一種選擇培養基。3)鑒別培養基在培養基中加入某種試劑或化學藥品,使難以區分的微生物經培養后呈現出明顯差別,因而有助開快速鑒別某種微生物。這樣的培養基稱之為鑒別培養基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍培養基就是一種常用的鑒別性培養基。
培養基制備的基本方法和注意事項:1、培養基配方的選定:同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養基的制備記錄:每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,較終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。制備培養基的操作要點:體培養基營養成分分布均勻。
種子培養基:種子培養基是供孢子發芽、生長和大量繁殖菌絲體,并使菌體長得粗壯,成為活力強的“種子”。所以種子培養基的營養成分要求比較豐富和完全,氮源和維生素的含量也要高些,但總濃度以略稀薄為好,這樣可達到較高的溶解氧,供大量菌體生長繁殖。種子培養基的成分要考慮在微生物代謝過程中能維持穩定的pH,其組成還要根據不同菌種的生理特征而定。一般種子培養基都用營養豐富而完全的天然有機氮源,因為有些氨基酸能刺激孢子發芽。但無機氮源容易利用,有利于菌體迅速生長,所以在種子培養基中常包括有機及無機氮源。較后一級的種子培養基的成分好好能較接近發酵培養基,這樣可使種子進入發酵培養基后能迅速適應,快速生長。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質變性從而達到殺死微生物的效果。湖北培養基制備器安裝調試
制備培養基的操作要點:固體培養基在實際中用得十分普遍。湖北培養基制備器安裝調試
天然培養基中血清主要作用:提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。湖北培養基制備器安裝調試