實驗室在制作培養基時候的經驗總結:培養基分裝:培養基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為恰當。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒,以利于培養基的徹底滅菌。每批培養基應另外分裝20ml培養基于一小玻璃瓶中,隨該批培養基同時滅菌,以為測定該批培養基較終pH之用。制備培養基的操作要點:成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,。新疆瓊脂滅菌 培養基制備器
培養基配制:素:為防止培養時期細菌的污染,可在培養基中添加適當素,一般用量與組織細胞培養相同:卡那霉素100單位/毫升,或雙抗--青霉素100單位/毫升,鏈霉素100微克/毫升。植物血凝素(PHA):非增殖期的細胞不能制備染色體,如人外周血淋巴細胞,但在離體培養過程中,在PHA的作用下,可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經實驗測定其分裂高峰分別于培養后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖,蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂,蛋白質起凝集作用。PHA的細胞數隨其濃度而增加,直至全部免疫活性細胞均被為止,但PHA濃度過高會引起凝集,一般采用4%濃度為好。新疆瓊脂滅菌 培養基制備器全自動培養基制備分裝系統:運行過程順滑無聲;大程度的削減了噪音。
培養基制備的基本方法和注意事項:1.培養基成分的稱取培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂.較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側,每稱完一種成分即在配方上做出記號,并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側,每種稱取完畢后,即移放于右側。完全稱取完畢后.還應進行一次檢查。2.培養基各成份的混合和溶化培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。
培養基制備基本方法:培養基配方的選定,同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的加以選用,記錄其來源。培養基pH的初步調整,培養基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正,因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的很終pH,保證培養基的質量。pH調正后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。培養基制備器血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
培養基制備的基本方法:1、培養基配方的選定:同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養基的制備記錄:每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。培養基制備器外控高低電平控制啟停,正反,簡易分裝,光耦隔離;外控模擬量調節轉速。新疆瓊脂滅菌 培養基制備器
培養基配好后不宜久置,很好現配現用。新疆瓊脂滅菌 培養基制備器
培養基的質量測試:每批培養基制備好以后,應仔細檢查一遍,如發現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養基沾染等、均應挑出棄去。并測定其較終pH.將全部培養基放入36±1°C恒溫箱培養過夜,如發現有菌生長,即棄去。用有關的標準菌株接種1~2管或瓶培養基,培養24~48小時,如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次,如結果仍同前,則該批培養基即應棄去,不能使用。培養基的保存:培養基應存放于冷暗處,較好能放于普通冰箱內。放置時間不宜超過一周,傾注的平板培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基制備記錄副頁或明顯標簽。新疆瓊脂滅菌 培養基制備器
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