培養(yǎng)基的制備步驟有哪些:第1,用水:培養(yǎng)基制備用水應(yīng)使用電阻率不小于30萬(wàn)Ωcm的蒸餾水或與其同質(zhì)的水,較好不使用離子交換器生產(chǎn)的去離子水。第二,稱量。稱量時(shí)要用獨(dú)有的角匙,避免交叉污染而影響檢驗(yàn)結(jié)果;干粉培養(yǎng)基易吸潮,如有條件,盡量在濕度較低的房間稱取培養(yǎng)基。第三,復(fù)水,復(fù)水時(shí)不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長(zhǎng);容器的大小需大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍以上,避免在加熱溶解過(guò)程中,培養(yǎng)基溢出;含有瓊脂粉的培養(yǎng)基,在加熱溶解之前可以浸泡數(shù)分鐘;加熱培養(yǎng)基時(shí)一定要進(jìn)行攪拌,特別是瓊脂類培養(yǎng)基。為避免燒焦和沸騰溢出,對(duì)于少量的培養(yǎng)基較好使用沸水浴進(jìn)行加熱。培養(yǎng)基制備器每稱完一種成分即在配方面軍做出記號(hào),并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè)。重慶瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)平板培養(yǎng)基是被用于獲得微生物純培養(yǎng)的很常用的固體培養(yǎng)基形式,它是冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無(wú)菌培養(yǎng)皿中形成的培養(yǎng)基固體平面,常被簡(jiǎn)稱為培養(yǎng)平板。也叫平面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基常用于單孢分離,測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速度,觀察菌落的形態(tài),拮抗實(shí)驗(yàn),測(cè)定接種空間雜菌數(shù)。平板培養(yǎng)基制作方法如下:將培養(yǎng)皿洗凈、干燥,使各培養(yǎng)皿蓋方向一致,用牛皮紙包好,或放入特制鐵罐內(nèi),注明皿蓋的方向。高壓滅菌或干燥滅菌后備用。取剛滅菌后尚未凝固的培養(yǎng)基置于無(wú)菌箱或超凈工作臺(tái)內(nèi),先左手持三角瓶,右手反轉(zhuǎn)手掌用中指和無(wú)名指撥出棉塞或硅膠賽(或不翻轉(zhuǎn)手掌用小指和手掌撥出棉塞),同時(shí)將三角瓶轉(zhuǎn)換至右手,而后左手拿平皿,以大拇指和中指將皿蓋打開(kāi)一縫,至瓶口剛好伸人。三角瓶口經(jīng)火焰燒灼后,傾入滅菌或溶化、冷卻至55~60°C的培養(yǎng)基約15mL(勿使瓶口靠在平皿壁上,以免沾染皿壁),迅速蓋好皿蓋,置于桌上輕輕旋轉(zhuǎn)平皿,使培養(yǎng)基均勻分布于整個(gè)平皿底部,冷凝后即為平板培養(yǎng)基。有時(shí)凝固后的培養(yǎng)基表面有冷凝水,可將平皿蓋打開(kāi)倒置于37℃溫箱,除去冷凝水,否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。為防止冷凝水過(guò)多,也可將培養(yǎng)基冷卻至45~50°C再倒平板。四川自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器具有液量分配,時(shí)間分配,復(fù)制分配三種工作模式。
全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器十分靈活——隨時(shí)可以讓你快速的滅菌制備高質(zhì)量的培養(yǎng)基。這可以好大限度的減少用于儲(chǔ)藏成品培養(yǎng)皿的空間,消除對(duì)培養(yǎng)皿儲(chǔ)存的管理,保證高質(zhì)量的培養(yǎng)基均一性。它能夠迅速而溫和的滅菌培養(yǎng)基并精確監(jiān)控和控制滅菌過(guò)程中的時(shí)間、溫度、壓力等參數(shù),從而保證其所有滅菌的產(chǎn)品都擁有同樣的,其直觀的圖形界面及可編程功能能使每個(gè)人都能方便的操作這臺(tái)儀器。培養(yǎng)基制備程序:Sampleprep可以快速的準(zhǔn)備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統(tǒng)”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導(dǎo)),加入培養(yǎng)基原料,準(zhǔn)備啟動(dòng)滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在Sampleprep內(nèi)懸浮溶解。強(qiáng)力磁力攪拌確保培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性,并防止凝結(jié)。培養(yǎng)基可以在滅菌前用WATERBATH(水?。┠J筋A(yù)先溶解。同時(shí),直觀的圖形化界面使沒(méi)有經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn)的人員也能方便的操作。用戶可以自定義設(shè)置多達(dá)50個(gè)滅菌程序,比如滅菌溫度、時(shí)間、分裝溫度等。它們可以被儲(chǔ)存起來(lái)并隨時(shí)調(diào)用。
培養(yǎng)基配置原則:在配制用于觀察和定量測(cè)定微生物生長(zhǎng)狀況的合成培養(yǎng)基時(shí),常需在培養(yǎng)基中加入少量螯合劑,避免培養(yǎng)基中產(chǎn)生沉淀,常用的螯合劑為乙二胺四乙酸。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進(jìn)行滅菌,然后再混合,避免形成沉淀;高壓蒸汽滅菌后,培養(yǎng)基pH會(huì)發(fā)生改變(一般使pH降低),可根據(jù)所培養(yǎng)微生物的要求,在培養(yǎng)基滅菌前后加以調(diào)整。在配制培養(yǎng)基過(guò)程中,泡沫的存在對(duì)滅菌處理極不利,因?yàn)榕菽械目諝庑纬筛魺釋?,使泡沫中微生物難以被殺死。因而有時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生,或適當(dāng)提高滅菌溫度。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分普遍。
MS培養(yǎng)基的特點(diǎn):MS培養(yǎng)基普遍被使用,它的無(wú)機(jī)鹽濃度較高,十分有利于組織生長(zhǎng)所需的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)和加速愈傷組織的生長(zhǎng)。因?yàn)榕浞街械碾x子濃度高,在配制、貯存、消毒等過(guò)程中,即使有些成分略有出入,也不會(huì)對(duì)離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養(yǎng)基可以用來(lái)對(duì)愈傷組織可以進(jìn)行誘導(dǎo),或者用來(lái)培養(yǎng)胚、莖段、莖尖及花藥。在進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí),它的液體培養(yǎng)基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養(yǎng)基中,有比較適當(dāng)比例和數(shù)量的無(wú)機(jī)養(yǎng)分,能夠滿足植物細(xì)胞在營(yíng)養(yǎng)上和生理上的需要。所以,通常情形下,氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機(jī)附加成分不需要再被添加。MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養(yǎng)基的基本成分要更加的高,這亦是其的明顯特征。選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。湖北大容量 培養(yǎng)基制備器
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培養(yǎng)基的制備:(1)稱量:根據(jù)培養(yǎng)基的配方,稱取適量藥品于搪瓷杯中;(2)溶解:用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;(3)分裝:根據(jù)不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過(guò)三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長(zhǎng)的1/5(需根據(jù)試管的大小而定).液體培養(yǎng)基如乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基約分裝10毫升左右.(4)塞硅膠塞:裝好培養(yǎng)基的試管應(yīng)塞上硅膠塞,松緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內(nèi),這樣即可過(guò)濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā).(5)包裝:三角瓶棉塞頭部應(yīng)用錫箔紙包扎,試管集中于試管簍.2、無(wú)菌水的制備:(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水(稀釋水)裝入試管中.(2)用100ml量筒量取95ml蒸餾水(稀釋水)裝入150ml的三角瓶中.可置少許玻璃珠于三角瓶?jī)?nèi),防止暴沸.(3)量取240ml蒸餾水(稀釋水)于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包扎好,高壓滅菌備用。重慶瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器