培養基的質量測試:每批培養基制備好以后,應仔細檢查一遍,如發現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養基沾染等、均應挑出棄去。并測定其較終pH.將全部培養基放入36±1°C恒溫箱培養過夜,如發現有菌生長,即棄去。用有關的標準菌株接種1~2管或瓶培養基,培養24~48小時,如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次,如結果仍同前,則該批培養基即應棄去,不能使用。培養基的保存:培養基應存放于冷暗處,較好能放于普通冰箱內。放置時間不宜超過一周,傾注的平板培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基制備記錄副頁或明顯標簽。全自動培養基制備儀主要特點:外部管口連接處可直接噴燈消毒。河南瓊脂培養基 培養基制備器
培養基制備的基本方法和注意事項:1、培養基配方的選定:同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外,一般均應盡量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其來源。2、培養基的制備記錄:每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源,和各種成份的牌號,較終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等,記錄應復制一份,原記錄保存備查,復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。上海培養基制備器安裝調試培養基制備器具有液量分配,時間分配,復制分配三種工作模式。
微生物檢驗培養基制備的要點:調培養基pH,雖然中海培養基中含有緩沖物質,可以盡量使培養基的pH值保持在標準范圍內,但如果配制的培養基不能要求,則必須進行必要的調整。如果您有校準過的pH計,則可以使用pH計。如果沒有,可以使用精確的pH試紙,然后根據需要使用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸進行微調。使用0.1氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸進行調整至所需的pH值。培養基有酸性或堿性,pH值一般為7.4~7.6。對于需要用氫氧化鈉高壓滅菌的介質,將pH調至比要求值高0.1~0.2個單位,因為用氫氧化鈉調節時,高壓滅菌后介質的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培養基中含有碳酸鈣,則無需調整pH值。
根據培養基的物理狀態來區分,可以分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基。1)液體培養基所配制的培養基是液態的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養基營養成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態。2)固體培養基在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養基在實際中用得十分普遍。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。3)半固體培養基如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中,就制成了半固體培養基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。
培養基pH的初步調正:因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行PH的初步調正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的較終PH,保證培養基的質量。PH調整后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。培養基的過濾澄清:液體培養基必須澄清,瓊脂培養基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。培養基制備器通過分裝口可以定量添加無菌添加劑。河南瓊脂培養基 培養基制備器
培養基制備器利用與外部水連接的盤狀熱交換器,能夠使內部迅速冷卻。河南瓊脂培養基 培養基制備器
培養基的分類:培養基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗干凈并經干烤消毒,以利于培養基的徹底滅菌。每批培養基應另外分裝20ml培養基于一小玻璃瓶中,隨該批培養基同時滅菌,以為測定該批培養基較終pH之用。河南瓊脂培養基 培養基制備器