培養基制備技術:一、玻璃器皿的清洗:在制備培養基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況,經過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經過滅菌等準備就緒后,才能使用。1、新購的玻璃器皿:除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業鹽酸中數小時,使游離的堿性物質除去,再以流水沖凈。對容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉動容器使其內部表面均沾有鹽酸,數分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。2、用過的玻璃器皿:凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時沖洗,吸取過化學試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經過適當消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。培養基制備器功能強大的加熱器,能夠迅速加熱。海南培養基消毒 培養基制備器
培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,避免有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。Z好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,Z后必須加以補足。上海全自動培養基制備器培養基制備器解凍血清時,請按照的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)。
微生物檢驗培養基制備的要點:培養基滅菌處理:分裝完成的培養基應馬上滅菌。其殺毒滅菌方式主要有三種類型:高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數耐熱培養基。對于小份:使用121°C十五分鐘;大份:121°C三十分鐘;對于含碳水化合物的中.海培養基,需113~115°C十五分鐘。滅菌以避免糖分的破壞。煮沸滅菌法方式,此方法可用于含有不耐高溫物質的培養基。過濾除菌方式,過濾除菌,采用無菌技術定量添加培養基。血液和可以用無菌技術抽取并加入冷卻至約五十度的培養基中。當中'海培養基中含有不耐熱物質時可以使用此方法。
平板的制備和儲存:傾注融化的培養基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少為3mm(直徑90mm的平皿,通常要加入18mL?20mL瓊脂培養基)。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲存,或者培養時間超過48h或培養溫度高于40℃,則需要傾注更多的培養基。凝固后的培養基應立即使用或存放于暗處和(或)5±3℃冰箱的密封袋中,以防止培養基成分的改變。在平板底部或側邊做好標記,標記的內容包括名稱、制備日期和(或)有效期。也可使用適宜的培養基編碼系統進行標記。將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長儲存期限。為了避免冷凝水的產生,平板應冷卻后再裝入袋中。儲存前不要對培養基表面進行干燥處理。對于采用表面接種形式培養的固體培養基,應先對瓊脂表面進行干燥:揭開平皿蓋,將平板倒扣于烘箱或培養箱中(溫度設為25~50℃);或放在有對流的無菌凈化臺中,直到培養基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。商品化的平板瓊脂培養基應按照廠商提供的說明使用。培養基制備器放入燒杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,邊加入邊用玻璃棒攪拌。
培養基pH的初步調正:因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行PH的初步調正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的較終PH,保證培養基的質量。PH調整后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。培養基的過濾澄清:液體培養基必須澄清,瓊脂培養基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。江西培養基制備器定制
培養基制備器培養不同的微生物必須采用不同的培養條件;培養目的不同,原料的選擇和配比不同。海南培養基消毒 培養基制備器
微生物培養基制備:溶解滅菌后,盤子上無不溶性結晶紫、無紫色斑;與未溶解和消毒的盤子相比,盤子上有結晶紫和紫色斑點。因此正確的步驟順序是在高壓滅菌前需要進行培養基煮沸溶解。先煮沸溶解后冷卻至二十五度,確定pH值;對需要高壓滅菌的介質取平均值,高壓滅菌后冷卻至二十五度,這兩種狀況測量培養基pH值,固體培養基至少檢測兩個點,取它們的平均值。控制培養基在容器中不要超過百分之八十,避免填充過多。注意控制高壓滅菌時間過長(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過121度,而且滅菌后的培養基在高溫環境中不要長時間存放。海南培養基消毒 培養基制備器