胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗陰性。5、支原體檢驗陰性。6、細菌內的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒陰性。8、大腸桿菌噬菌體陰性。9、支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個/ml,細胞倍增時間≤15h克隆率≥85%。血清的主要作用是提...
胎牛血清的生產工藝:透析胎牛血清,顧名思義,需經過透析。它是在4°C下用特定的透析膜對血清在0.15MNaCl中透析。由于該透析膜只允許10kDa以下的小分子穿過,在滲透壓的作用下,這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化學小分子、核苷酸、某些鹽、低分子量蛋白質、氨基酸、細胞因子、葡萄糖、殘留Antibiotic和其他外源分子。那么透析的效果如何?以及透析到何時呢?由于不可能監測全部小分子,因此常選用葡萄糖為體現。血清中葡萄糖
如何區別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其它不管是國產還是進口血清,都是不測Antibiotic的(無四環素胎牛血清之外)。國外,Antibiotic的使用很嚴格,用量也很少,每頭奶牛的產品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含Antibiotic或含量極低;國內,Antibiotic的濫用已成了普遍現象,血清中殘留很高,對細胞培養極為不利,這是國產血清質量差的根本原因...
胎牛血清:解凍胎牛血清時,請按照規定的的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。解凍胎牛血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。請勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會變得混濁,同時胎牛血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響胎牛血清的質量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。胎牛血清保存需要避免陽光的照射,需要用恒溫冰箱來進行保存。宿遷特級血清價格胎牛血清的處...
如何區別真假胎牛血清:沉淀,很多血清客戶,會發現進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質量問題,這是沒有根據的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,和廠家的加工生產方式密切相關。國產的血清,大多來自北方,由于價格低廉,保存環境都不好,從采的血、冷凍、運輸到生產會經過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產生。澄清度,進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,表現為稀薄、清淡,而國產血清,因為絕大多數是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,可容...
胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內的瓶中。采的血瓶采的血前經干烤滅菌(180℃2小時)后,按無菌操作注入10毫升左右經高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動瓶內生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁后倒出,再進行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時,再放入4℃冷庫4小時以備離心。胎牛血清具有極為重要的功能。韶關OriCell血清品牌挑選胎牛血清:Antibiotic含量,Antibiotic的使用情況,也需考慮在內。國內外的血清,都不對Antibiotic進...
國際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性,不會產生沉淀,同時能縮短血清融化時間。關于胎牛血清的滅活:真正的胎牛血清因為胎牛沒有形成有效補體,如果針對補體滅活的話,就不需要。其他情況根據實驗設計來決定。胎牛血清的濃度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎培養基中,混合后配成完全培養基。曾有文獻報道,不同胎牛血清濃度對細胞存在一定的影響,尤其是干細胞和原代細胞。具體很好濃度需要用戶根據自己的實驗來確定,以既保證培養的效果,又避免血清的浪費。血清的主要作用是提供基本營養物質、提供和各種生長因子、提供結合蛋白。宿遷賽業血清哪家好血清是血液凝固后的液體部分,不含血細胞、纖維...
很好的胎牛血清對細胞成長的作用:提供細胞生長所需的天然或天然的生長因子。提供天然的結合蛋白,能識別氨基酸、脂質、金屬離子和等,能結合并調節它們的活性。已知清蛋白即具有上述功能,并對細胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白,具有多個鈣離子結合位點,因而能調節和維持血清中的鈣離子濃度。天然含有粘附蛋白等細胞外基質成分,促進細胞的附著、鋪展。提供醫治功能。這主要通過血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結合來完成的。如金屬硫蛋白,對多種重金屬有高度親和性,并可消除細胞生長環境中的氧自由基,具有很強的抗氧化活性,可防止細胞衰老。提供酸堿度緩沖的作用,以及維持滲透壓。提供蛋白酶...
國際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性,不會產生沉淀,同時能縮短血清融化時間。關于胎牛血清的滅活:真正的胎牛血清因為胎牛沒有形成有效補體,如果針對補體滅活的話,就不需要。其他情況根據實驗設計來決定。胎牛血清的濃度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎培養基中,混合后配成完全培養基。曾有文獻報道,不同胎牛血清濃度對細胞存在一定的影響,尤其是干細胞和原代細胞。具體很好濃度需要用戶根據自己的實驗來確定,以既保證培養的效果,又避免血清的浪費。胎牛血清是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。上海不含外泌體血清供應商胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清...
多數細胞培養中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數有促進的情況下,其促進的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導致的沉淀常常被認為是微生物的污染,從而給用戶和供應商都帶來不必要的麻煩。所以胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統,因此,胎牛血清不會真正干預免疫試驗。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養效果。血清的主要作用是提供基本營養物質、提供和各種生...
加工是對采集到的很好胎牛血清進行解凍,在這個過程中溫度及環境指標的控制至關重要,解凍的過程是整個流程中較為容易產生細菌累積的步驟,精確控溫的分步解凍可以極大的減少這個步驟的細菌累積。解凍后的血清會被送到制劑室進行分離,分離后的血清需經過多次過濾以去除生物污染。較為終的成品血清會被分裝包裝后進行后續的運輸及銷售。整個生產的過程中還會有一系列的質量相關的成分檢測。國內的生物產業正在迎來一輪新的發展高峰,生命科學研究發展快速,科研項目數量也逐年遞增,前沿課題的研究都需要培養大量的細胞。就目前的實驗環境來看,含有FBS的細胞培養基仍然是目前主流的細胞培養體系。熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解...
很好的胎牛血清:免疫球蛋白,國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出的時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。含量,此外,的使用也是要考慮在內的。國內外的血清,都不對進行測試(無四環素胎牛血消除外)。其中,由于國外使用較為嚴格,用量有限,同時每頭奶牛的產品包括血清都可以追溯源頭,所以國外胎牛血清不含或者含量極低。但是國內由于使用普遍,血清中殘留量很高,導致國產血清質量很差,不利于細胞培養。熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步...
國際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性,不會產生沉淀,同時能縮短血清融化時間。關于胎牛血清的滅活:真正的胎牛血清因為胎牛沒有形成有效補體,如果針對補體滅活的話,就不需要。其他情況根據實驗設計來決定。胎牛血清的濃度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎培養基中,混合后配成完全培養基。曾有文獻報道,不同胎牛血清濃度對細胞存在一定的影響,尤其是干細胞和原代細胞。具體很好濃度需要用戶根據自己的實驗來確定,以既保證培養的效果,又避免血清的浪費。胎牛血清的牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。麗水優等血清廠家血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖...
很好的胎牛血清:免疫球蛋白,國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出的時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。含量,此外,的使用也是要考慮在內的。國內外的血清,都不對進行測試(無四環素胎牛血消除外)。其中,由于國外使用較為嚴格,用量有限,同時每頭奶牛的產品包括血清都可以追溯源頭,所以國外胎牛血清不含或者含量極低。但是國內由于使用普遍,血清中殘留量很高,導致國產血清質量很差,不利于細胞培養。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護...
熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,而補體所參與的反應有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和。有必要做熱滅活嗎?實驗顯示,經過正確處理的熱滅清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是 "小黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤...
胎牛血清是細胞培養重要的培養基且不可替代,它是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發育因子,非常適合各種細胞的培養。因此,如何在使用過程中保護這些因子的活性,達到較為大的細胞培養效果,就需要正確地使用胎牛血清。正確地使用胎牛血清可分為以下四個方面:正確儲存,避免反復凍融:血清在-20°C凍存。血清避免反復凍融,以免降低因子活性。如一次用不完,應進行分裝。血清和培養基應盡可能“現用現配”,配好的培養液,應于一周內用完。血清避免在4°C或更高溫度靜置過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質。血清可提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量...
那么如何保障胎牛血清的品質呢:內有毒的,內有毒的含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內有毒的≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;10EU/ml<內有毒的≤ 25EU/ml時,此血清為優級胎牛血清;內有毒的≥ 25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清;應選取內有毒的含量低的胎牛血清,使培養的細胞更健康。如果選取內有毒的較高的血清,細胞一直泡在“毒液”里,短期內細胞看不出太明顯的變化,但長期的話細胞會衰老得較快,從而對實驗結果造成嚴重影響。微生物:微生物包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。嚴格的生產工藝可以對細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。同時3次0.1um過濾可以完...
添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養液,因為如果培養液有沉淀的存在,會使得其中培養的細胞產生大量的黑點,除此之外,細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質,總之出現這樣的情況會極其不利于細胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養液中使用。注意解凍的方法:再高質量的胎牛血清也要在使用的時候堅持謹慎的原則,因此在解凍血清的時候,要細心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點,事先為血清預留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國際通用的解方式解凍血清。胎牛血清起酸堿度緩沖液作用。...
合格的胎牛血清都需要經過嚴格的多重質檢和驗證,這里需要特別關注胎牛血清的相關質量合格證明,不但不能含有有害微生物,如細菌、菌類、支原體、病毒等,同時也必須通過了各種性能測試實驗。通過驗證細胞的形態、增殖速度、克隆形成率等多項測試,性能表現優異的胎牛血清對細胞培養更友好,效果更明顯。胎牛血清作為畜牧業的副產品,產量十分有限,且受到天然環境、食物衛生、經濟條件及等各種因素的影響,很好的胎牛血清就更加稀有。因此,找到穩定提供同批次胎牛血清的供應商,對于確保自己細胞實驗結果的真實性和可重復性具有重要意義,還能大量節省試錯(經濟)成本。新牛血清取自出生24小時之內的新生牛。深圳無外泌體血清報價很好的胎牛...
購買回來的血清都是冰凍狀態,使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態下慢慢進行,待溶解完成,我們觀察到的胎牛血清會表現出黃色或紅色。并不是越紅越好,也不是越黃越好,淡黃色到淡紅色才是比較正常的顏色范圍。很多培養細胞的寶寶會發現進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質量問題。那么,血清中可能出現的沉淀物是什么?纖維蛋白,它是經常出現的較大的沉淀物,可以達到1-2mm,可以用肉眼觀察到。磷酸鈣,它也是常見的一種沉淀物,通常會使血清出現渾濁,并且在37℃培養的時候會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點,這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動,因此經常被誤認為是微生物污染。膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質,...
胎牛血清的整個生產流程可以分為原料采集,原料加工以及冷鏈運輸。原料采集作為胎牛血清整個生產流程的第一步也是關鍵的一步,對產品的較為終質量起了決定性的影響。采集過程一般要求在各個血源地相關部門認證的農場現場采集胎牛血漿,以確保采集對象為獸醫監管下經臨床檢查為健康的動物。同時,整個采集的過程還需要在無菌環境下進行,一些很好的供應商甚至提供了全封閉的采集系統,徹底避免血清與空氣的接觸,這樣較為終的血清產品內的內有毒的以及血紅蛋白等成分才會維持在一個極低的水平,確保了獲取的原始血漿質量。采集到了很好的原料,下一步就是對采集到的原料進行加工。原料到加工往往會涉及運輸的過程,由于生物制品需要冷鏈運輸的特殊...
如何避免血清中產生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產生:解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。血清的保存應該注意:需要長期保存的...
血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。珠海賽業血清供應...
添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養液,因為如果培養液有沉淀的存在,會使得其中培養的細胞產生大量的黑點,除此之外,細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質,總之出現這樣的情況會極其不利于細胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養液中使用。注意解凍的方法:再高質量的胎牛血清也要在使用的時候堅持謹慎的原則,因此在解凍血清的時候,要細心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點,事先為血清預留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國際通用的解方式解凍血清。解凍血清時,請隨時將之搖晃均...
國內科研人員購買胎牛血清的現狀:難辨真假。 原因很多,一方面是國內血清市場這幾年是愈發的混亂了,很多商家都盯上了這塊“蛋糕”,現在國內市場能見到的各種來源的血清品牌大于50種,使用者在不了解國家政策和相關知識的前提下很難去辨別和選擇安全、穩定、合規的胎牛血清。另一方面是客戶很難找到血清相關的真實信息,即便想去分辨也無從下手,只能聽商家的了。現在允許進口的血清產地很少,只有南美(烏拉圭)、澳大利亞、新西蘭。對血清行業有些了解的人看到這些,就會知道能夠進口到國內的胎牛血清注定是很少的。熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化。無錫OriCell胎牛血清血...
胎牛血清用于細胞培養不過百年歷史,但發展得相當快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細胞培養技術的方面,國外起步較早,認識也較深入。應該說,胎牛血清在細胞培養基方面,具有的優勢。因為其營養,所以幾乎適合所有類型的細胞生長,每種細胞都可以從中攝取自己所需的養分。而且,胎牛血清還含有適合細胞貼壁鋪展以及抗氧化和醫治的成分,這使得它成為天然通用的很好培養基。據研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動,有時甚至波動較大。因此,在持續使用胎牛血清時,要注意盡量同一批次的。通常,同一批次的血清數量有限,一次大約不超過2000升。因此,在更換批次時,要注意觀察細胞...
血清的安全風險因素主要有以下方面:地理因素,地理因素包括血清產地的流行病學趨勢、基礎設施情況以及血源供應量。措施得當可以預防能避免的動物疾病,同時產地國穩定可靠的基礎設施,對保證供應鏈的安全也十分必要。血源是否充足則決定了血清是否可源源不斷地持續供應。生產,生產遵循cGMP指南,則可保證血清質量,降低有關無菌過濾、摻加和標簽錯誤的風險。cGMP為現場審核的開展提供了框架。生產過程中對血清進行有效的無菌過濾也是十分重要的。產品質控,有效的無菌過濾使得細菌污染的風險很低。對于支原體和病毒篩查,一些相關規范內部存在一定的方法靈活性,這使得采取不同方法進行支原體和病毒篩查成為可能,并且有時使得要篩查的...
如何避免血清中產生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產生:解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定...
牛血清是細胞培養中用量較為大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數生長的,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到醫治作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾。泰州標準級胎牛血清銷售...