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Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag，His?Tag等重組表達蛋白及抗體，適合～0.5 mL裂解液操作 6次低速離心，總耗時~100分鐘（含65分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理...

樣品的澄清、過濾和除菌 Ultrafree?-MC和Ultrafree?-CL微濾管 Ultrafree?-MC（0.5mL）和Ultrafree?-CL（2mL）是一次性使用的微濾離心管，可以用于各種水性樣品和在某些溶劑中的樣品除顆粒物、除沉淀的處理。提供兩種體積及多種膜孔徑以及已經經過無菌處理的產品供選擇。Ultrafree?微濾離心管操作簡便、樣品回收率高且重復性很好，是蛋白和核酸樣品處理的理想選擇。 特點與優點 有0.1-5.0μm五種膜孔徑供選擇 采用高回收率的親水Durapore? (PVDF)膜和親水PTFE膜 提供無菌包裝和非無菌包裝形式產品 過濾速度快，數據穩定...

大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內濃縮至350μL；死體積設計確保樣品不會被離干而損失。依起始材料不同、起始體積不同，樣品可被濃縮50-200倍。低吸附豎向再生纖維素超濾膜及雙超濾柱設計，加快處理速度；反轉離心操作進一步使寶貴的濃縮樣品回收率得以提高。這個產品替代傳統的透析、凍干、沉淀或攪拌式濃縮等技術和方法，是非常方便的工具。 特別推薦的應用： 色譜洗脫產物的濃縮和脫鹽 單克隆抗體濃縮 培養上清中蛋白和***的濃縮 組織勻漿液和細胞裂解液澄清超濾濃縮管直銷公司。嘉定區超濾濃縮管...

大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內濃縮至350μL；死體積設計確保樣品不會被離干而損失。依起始材料不同、起始體積不同，樣品可被濃縮50-200倍。低吸附豎向再生纖維素超濾膜及雙超濾柱設計，加快處理速度；反轉離心操作進一步使寶貴的濃縮樣品回收率得以提高。這個產品替代傳統的透析、凍干、沉淀或攪拌式濃縮等技術和方法，是非常方便的工具。 特別推薦的應用： 色譜洗脫產物的濃縮和脫鹽 單克隆抗體濃縮 培養上清中蛋白和***的濃縮 組織勻漿液和細胞裂解液澄清超濾濃縮管代理銷售哪家比較靠譜。奉賢...

通量（超濾效率）及其影響因素 超濾過程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積，使用高 NMWL 濾膜可以增加通量，但同時 會降低回收率。選擇膜和裝置時需要同時考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多，包括： 壓力：較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進行超濾時，流量隨著跨膜壓力 （TMP）的增大而增加。正壓條件下操作，如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯， 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***，通量會達到一個平臺，甚 至可能隨著壓力的增加而降低。超濾濃縮管的優點有很多。普陀區默克0.5ml超濾濃縮管聯系人樣品的澄清、過濾和除...

7次低速離心，總耗時~100分鐘（含60分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（可選用50k MWCO型號）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入2...

無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據樣品的粘稠程度，以及需要制備的目標外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便達到更好的得率和操作體驗。 樣品體積大于 30mL 時可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管，請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內時吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進一步提高特定外泌體的純度，可選用包被相應抗體的磁珠進行親...

默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設計，一經推出即成為生物樣品操作的行業頭牌產品。不論是蛋白、核酸、病-毒-或顆粒物，抑或低濃度樣品或寶貴的活性樣品，Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標準化，并滿足下游各種應用的要求，使研究者處理樣品時倍感輕松。 這款Amicon Ultra 15 mL離心式過濾器借助10 kDa NMWL的濾膜可以進行蛋白濃縮。Amicon Ultra離心式過濾器是蛋白純化、蛋白濃縮和脫鹽的理想工具。 Amicon? Ultra 超濾管的獨特優點： 有效濃縮同時保證高的蛋白回收率 1.合理的死體積設計 2...

濃度：當需要截留的樣品濃度很低時，通量通常不受濃度影響。操作過 程中，隨著溶質濃度的升高，增加的粘滯性和極化將導致通量降低。 溫度：粗體，作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時的溫度可 以提高超濾效率。每增加 1℃蛋白擴散率增加 3-3.5%，同時溶液粘度降低。 實踐中一般是以樣品和設備能耐受的比較高溫度來操作。 pH：改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結構，蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會沉淀，產生堵塞和得率損失。 污垢：溶液中除了目的分子造成的濃差極化，還有其它小顆粒和分子會 在膜上富集和沉淀，逐漸堆積在膜孔上或膜孔結構中，形成結晶和沉淀。益啟生物公司就帶您了...

蛋白復性，溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理，采用溫和的透析方法可以避免其在過度濃縮時發生沉淀和離心操作剪切力對樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設計的透析管，**提高了樣品透析表面積，在2-5小時內即可完成透析，是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨特優點： 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質，增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會像使用夾子或打結那樣造成樣品滲漏和污染，安全可靠 旋蓋式設計，易于打開和關緊 硬管設計，易于更充分地吸取、移走樣品，即使是μL級樣品加樣方便，功能多樣 ? 采用標準***頭加樣，而非注射器和...

大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內濃縮至350μL；死體積設計確保樣品不會被離干而損失。依起始材料不同、起始體積不同，樣品可被濃縮50-200倍。低吸附豎向再生纖維素超濾膜及雙超濾柱設計，加快處理速度；反轉離心操作進一步使寶貴的濃縮樣品回收率得以提高。這個產品替代傳統的透析、凍干、沉淀或攪拌式濃縮等技術和方法，是非常方便的工具。 特別推薦的應用： 色譜洗脫產物的濃縮和脫鹽 單克隆抗體濃縮 培養上清中蛋白和***的濃縮 組織勻漿液和細胞裂解液澄清超濾濃縮管的系列有很多。楊浦區默克2...

無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據樣品的粘稠程度，以及需要制備的目標外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便達到更好的得率和操作體驗。 樣品體積大于 30mL 時可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管，請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內時吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進一步提高特定外泌體的純度，可選用包被相應抗體的磁珠進行親...

這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應用兼容，常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進行緩沖液置換。傳統透析方法需要時間很長，多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活，而且***還需要一步濃縮。新產品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新，需一步溫和的滲濾操作即可達到同時對樣品進行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標準 操作步驟的優化與簡化往往帶來更好的結果，數據的穩定性、可比性和高通量化隨之得以改 善，默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為...

膜的吸附損失 對于濃度很低及珍貴的樣品，除了考慮截留效率和操作方便外，額外 要關注的是采用的超濾膜及設備對目標蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質對生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對生物分子吸附**小，是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產品成為優先的**技術關鍵之一。濾膜和裝置表面對溶質的 吸附對樣品收率會產生直接影響，所以如果希望盡可能提高得率，就 應該考慮采用較小的設備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應該選 用膜面積小的裝置，同時保證一定的流速。默克密理博設計了一系列 離心式或攪拌式裝置，配合不同的膜面積、不...

外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ，4000g離心 X 10 min。 從超濾...

蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過 20mg/ml。對于對濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白，建議的改進方法是： 1）離心力降為推薦離心力的30%-50% 2）改用截留分子量更大的超濾管（如原本選用10k，此時可以選擇30k） 3）在濃縮過程中取出超濾管，用***頭反復吹吸幾次后再繼續濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現這種情況，請先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應立即使用，如暫時不用，請保持潤濕狀態，避免重新干燥。上海超濾濃縮管代理銷售哪家好？江蘇默克...

基于 Millipore? 先進的膜過濾技術，默克密理博開發了獨特的腺***及慢***純化與濃縮試劑盒。試劑盒中已經包括了必需的 Steriflip? 過濾裝置和超濾管，能在短短 2 小時內安全、快捷地獲得高產***。 節約時間：整個操作需 2 小時。 產量高：***回收率超過 70%。 整體體驗極好：流程簡便而***質量高。 設計新穎易操作：Steriflip? 過濾裝置可以替代昂貴的設備，使原本繁瑣凌亂的操作變得簡單而標準。 安全：封閉的真空抽濾設計，完全避免樣品飛濺造 成的***污染和損失。你知道上海超濾濃縮管代理銷售哪家比較好嗎？青浦區默克2ml超濾濃縮管聯系方式脫鹽/緩沖...

雖然影響因素較多，我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜，這樣可以比較大化樣品的回收，同時節省過濾時間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計，表示大于這一規格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據NMWL分級，有時也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多數大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見，實踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時 膜截留分子量應該充分大于流過的溶質。當膜材料相同時，孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設備構...

Centrifree?過濾器 Centrifree? 過濾器擁有研究及體外診斷證書（美國適用），是為臨床研究實驗室的樣品制備而設計的，能夠快速、高效地通過超濾去除小體積（0.15–1.0 mL）血清、血漿等生物樣品中的蛋白未結合的小分子溶質。數分鐘之內完成精確的分離，樣品終體積約為 10μL；不會發生樣品稀釋、pH 值變化、離子成分變化或未結合小分子溶質濃縮等情況。這種產品使用的是低吸附的再生纖維素膜，親水膜和 O 型圈，不含增塑劑，確保獲得較好的樣品回收效果。 優點與應用： 分離血清、血漿等生物學樣品中未 吸附的小分子物質 精確的藥物結合實驗樣品制備使用 去除生物樣品中的蛋白質等...

超濾（UF）常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學性質、電荷等多種因素影響，這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa（MW）的分子，鹽和水等小分子會透過，因此在大分子樣品處理中得到了應用。膠狀或微粒狀物質也能夠被截留。UF膜既可以用于透過樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑，則經過膜處理可以達到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠遠大于膜孔徑，膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對于樣品更溫和，沒有發生容易導致生物大分子失活的相變，而且在濃縮的同時可以完成對溶質的除鹽。超濾的...

特點與優點： 特別的反轉離心回收設計，滯留體積很小，樣品損失少， 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數達到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設計的死體積防止離干，保證樣品回收率和活性 有四種截留分子量供選擇 法醫gDNA鑒定、PCR產物純化與小分子分離 Microcon? 超濾管 Microcon?為橫膜式超濾管，沒有死體積，用于大分子樣品的濃縮、脫 鹽、換液都非常高效方便。實際應用中還常用于大分子與其它分子的分 離，比如蛋白酶切后的處理及藥物結合率分析等等。超濾濃縮管的優點有很多。青浦區默克2ml超濾濃縮管報價核苷酸截留分子量（...

特點與優點： 特別的反轉離心回收設計，滯留體積很小，樣品損失少， 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數達到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設計的死體積防止離干，保證樣品回收率和活性 有四種截留分子量供選擇 法醫gDNA鑒定、PCR產物純化與小分子分離 Microcon? 超濾管 Microcon?為橫膜式超濾管，沒有死體積，用于大分子樣品的濃縮、脫 鹽、換液都非常高效方便。實際應用中還常用于大分子與其它分子的分 離，比如蛋白酶切后的處理及藥物結合率分析等等。益啟生物公司的超濾濃縮管系列有很多。徐匯區默克0.5ml超濾濃縮管Mil...

用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預切超濾膜片 Ultracel? 再生纖維素膜可以用來對較為稀釋的溶液進行脫鹽或濃縮。Ultracel? 膜是親水性的，微觀結構緊密，確保對蛋白、核酸等大分子吸附比較低而回收率比較高。 *膜的常規截留分子量分為1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直徑分為25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 對于大體積、高濃度（如蛋白濃度大于 1.0 mg/mL）的樣品進行脫鹽和濃縮，Biomax?聚苯醚砜（PES）超濾膜是很好的選擇。血清、血漿或條件組織培養基等，都是 Biomax?超濾膜適合處理的樣品。 *...

蛋白親和純化（無需換液和濃縮） * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管～1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法，但溶液體積和離心時間等需要略加優化。 3次低速離心，總耗時~75分鐘（含60分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂（沉降的柱床體積）和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。（柱床）樹脂量≥ 500μL時采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*，其間可溫和攪動促進結合。超濾濃縮管的好處有很多。無錫默克超...

對于慢***推薦Amicon? Ultra 100kDa; 對于腺***推薦Amicon? Ultra 50kDa。具體的操作步驟可以參考***濃縮純化試劑盒FTLV00003和FTAV00003的產品使用說明書。另提供AAV（腺相關***）的制備方法供參考。 去污劑因其獨特的性質，當濃度大于臨界微團濃度（Critical Micelle Concentration, CMC）時，去污劑分子會聚集形成微團而改變分子構象，這有可能會影響去污劑的去除效果。 Amicon? Ultra超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析，可用緩沖液或Milli-Q?水預清洗。如果干擾仍然存在，用0.1 N N...

這種小管適合在1.5mL離心機中使用，其Ultracel?超濾膜對于蛋白及其它成分都表現出 極低的非特異性結合，連同醫藥級O型圈封閉設計，確保更少的樣品丟失，更穩定的數據結果。諸多考慮周到的精細設計使Microcon?成為比較好用的樣品制備工具之一。 特點與優點： 低吸附膜和反轉回收設計，即使是小體積、低濃度樣品得率也能達到95%以上 可以用產品自帶的1.5mL樣品收集管存儲濾過液和濃縮產物 濃縮倍數可達100X 操作簡便快捷，易于標準化。 Microcon? DNA Fast Flow 超濾管 專門設計用于從含有SDS的溶液中濃縮和回收基因組DNA。管子和膜均為低非特異性吸附...

近年來隨著分離純化技術的提高，關于外泌小體的研究成果頗豐；這進一步吸引了越來越多領域的課題將外泌體納入研究對象。研究的前提是方便、高效、標準化地分離純化外泌小體。經過近20年的探索，已經建立了超速離心法、沉淀法、色譜法、親和純化法等。在大量實踐中大家逐漸認識到根據下游研究對樣品的要求，以及起始樣品的規模、數量，可以選擇不同的外泌體制備策略。因不需要特殊的設備和試劑盒，對操作人員也沒有特別的經驗要求，超濾法后來居上，成為實驗室中制備外泌體的通用方法。益啟生物公司的超濾濃縮管種類繁多。虹口區Merck離心濃縮管代理價蛋白親和純化（無需換液和濃縮） * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 ...

7次低速離心，總耗時~100分鐘（含60分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（可選用50k MWCO型號）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入2...

離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”，操作時樣品首先被濃縮，繼而加入新的溶液，再次濃縮時，原溶液已經被換成選定的溶液。 化學相容性與溶出 樣品的化學背景有時很多樣而復雜，過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學成分發生反應而產生溶出污染。關于默克密理博各種微濾、超濾產品的化學相容性請參考產品使用說明書或垂詢技術支持專線 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標溶質，但膜的很多特性會對這一目的產生影響。影響回收的因素包括：? 標稱分子量限制（NMWL）/ 核酸截留分子量（NCO）? 截留 ...

無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據樣品的粘稠程度，以及需要制備的目標外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便達到更好的得率和操作體驗。 樣品體積大于 30mL 時可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管，請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內時吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進一步提高特定外泌體的純度，可選用包被相應抗體的磁珠進行親...