培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無(wú)特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應(yīng)另行配成20%或更高的濃液,以過(guò)濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無(wú)菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體液和物品等則應(yīng)以無(wú)菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出,冷至55℃-60℃時(shí),擺置成適當(dāng)斜面,待其自然凝固。培養(yǎng)基制備器殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。青海培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試
制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):a.液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒(méi)有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài)。b.固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分普遍。在實(shí)驗(yàn)室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗(yàn)雜菌、計(jì)數(shù)、保藏、生物測(cè)定等。c.半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來(lái)觀察微生物的動(dòng)力,有時(shí)用來(lái)保藏菌種。中國(guó)香港自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器智能溫控功能,限度降低分裝機(jī)噪。
培養(yǎng)基的脫氣:必要時(shí),在使用前將養(yǎng)基放到沸水浴或蒸汽浴中加熱15min,加熱時(shí)松開(kāi)容器蓋子;加熱后蓋緊蓋子,并迅速冷卻至使用溫度。3.添加成分的加入:對(duì)熱不穩(wěn)定的添加成分應(yīng)在培養(yǎng)基冷卻至47℃~50℃時(shí)加入,滅菌的添加成分加入前應(yīng)冷卻至室溫,避免冷的液體會(huì)造成瓊脂凝膠或形成片狀物。4.培養(yǎng)基的棄置:所有污染和未使用的培養(yǎng)基的棄置應(yīng)采用安全的方式,并符合相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基較終pH之用。
Systec培養(yǎng)基準(zhǔn)備器可以快速的準(zhǔn)備好滅菌,放入滅菌鍋,“水套系統(tǒng)”里加入夾層水(滅菌鍋與滅菌鍋腔體之間的夾套水用于有效的熱傳導(dǎo)),加入培養(yǎng)基原料,準(zhǔn)備啟動(dòng)滅菌程序。培養(yǎng)基可以直接在Sampleprep內(nèi)懸浮溶解。強(qiáng)力磁力攪拌確保培養(yǎng)基在內(nèi)腔里混合的均勻性,并防止凝結(jié)。培養(yǎng)基可以在滅菌前用WATERBATH(水?。┠J筋A(yù)先溶解。同時(shí),直觀的圖形化界面使沒(méi)有經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn)的人員也能方便的操作。用戶可以自定義設(shè)置多達(dá)50個(gè)滅菌程序,比如滅菌溫度、時(shí)間、分裝溫度等。它們可以被儲(chǔ)存起來(lái)并隨時(shí)調(diào)用。培養(yǎng)基制備器負(fù)載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過(guò)溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生??諝鈮嚎s機(jī)是內(nèi)置的。
培養(yǎng)基質(zhì)量測(cè)試:(1)澄清度:水是細(xì)胞培養(yǎng)基的溶劑。細(xì)胞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分只有完全溶解于水才能被細(xì)胞吸收攝取,細(xì)胞才能生長(zhǎng)增殖,因此細(xì)胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用。該項(xiàng)目是通過(guò)對(duì)水溶解后的細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度檢查,判斷細(xì)胞培養(yǎng)基的澄清度。按中國(guó)藥典2005年版二部附錄ⅨB進(jìn)行。(2)pH值:哺乳類動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)需要合適的酸堿度,pH過(guò)高或者過(guò)低都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。pH值的測(cè)定也可以檢查細(xì)胞培養(yǎng)基的批間差。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細(xì)胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。按中國(guó)藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行;加入規(guī)定量的碳酸氫鈉到上述溶液中,按中國(guó)藥典2005年版二部附錄ⅥH進(jìn)行。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):溫度探頭測(cè)量培養(yǎng)基實(shí)際溫度,控溫很準(zhǔn)。甘肅培養(yǎng)基制備器哪個(gè)品牌好
培養(yǎng)基制備器啟停、正反、全速,調(diào)速、狀態(tài)記憶(掉電記憶)等功能。青海培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試
培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過(guò)容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)好好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基好終pH之用。青海培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試