培養(yǎng)基配制方法：正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗的較基礎(chǔ)步驟之一，使用脫水培養(yǎng)基和其他成分，尤其是含有有毒物質(zhì)（如膽鹽或其他選擇劑）的成分時，應(yīng)遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時，應(yīng)嚴格按照廠商提供的使用說明配制。如重量（體積）、pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時，應(yīng)按照配方準確配制，并記錄相關(guān)信息，如：培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積（分裝體積）、無菌措施（包括實施的方式、溫度及時間）、配置日期、人員等，以便溯源。調(diào)節(jié)氧化還原電位(Eh) 各種微生物對培養(yǎng)基的Eh要求不同。湖北瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基的性能測試：1.外觀控制：制備好的培養(yǎng)基應(yīng)有相應(yīng)的顏色，一般的培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應(yīng)檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化，是否蒸發(fā)/脫水。2.污染控制：從每批制備好的培養(yǎng)基中選取部分進行污染測試(無菌試驗)，確定無微生物生長方可使用。3.性能測試：(1)測試菌株選擇：測試菌株是具有其表示種的穩(wěn)定特性并能有效證明實驗室特定培養(yǎng)基較佳性能的一套菌株。(3)半定量測試方法（改進的劃線法接種法）。(4)定性測試方法（平板接種觀察法）。用接種環(huán)取測試菌培養(yǎng)物，在測試培養(yǎng)基表面劃平行直線。湖北瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。

配制培養(yǎng)基需要哪些制備：（1）稱出規(guī)定數(shù)量的瓊脂和蔗糖，加水直到培養(yǎng)基較終容積的34，加熱溶解，完全融解后的溶液是透明的。在配制液體培養(yǎng)基（不加瓊脂）時無需加熱。（2）按需要加入一定量的各種貯存母液，包括生長調(diào)節(jié)物質(zhì)和其他特殊附加物。吸取母液要使用專一的移液管。如有必要，培養(yǎng)基中所需的維生素，可在高壓滅菌之后通過減壓過濾裝置或微孔過濾器滅菌后再加入。（3）蒸餾水定容。充分混合后調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，一般以5.66.0為好。（4）培養(yǎng)基分裝，分裝量一般以占培養(yǎng)容器的1514為宜。之后在24h內(nèi)完成高壓滅菌，也可以高壓滅菌后再進行培養(yǎng)基的無菌分裝，室溫下存放備用。暫時不用的培養(yǎng)基應(yīng)放置于10攝氏度下保存，而含有生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的培養(yǎng)基在45攝氏度保存更佳。

培養(yǎng)基配制：配制用水，培養(yǎng)基的大部分是水，所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標準，水的電阻應(yīng)為200萬歐姆，一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基：培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調(diào)pH至7.2-7.4，若pH值超過7.6或遠低于6.8，則大多數(shù)細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。血清：培養(yǎng)中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體，置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類、時間而定，一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制，可選用無血清培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度過大，會使?jié)B透壓過高，使細胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長。

培養(yǎng)基制備方法與注意事項:1、培養(yǎng)基配方選擇同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應(yīng)嚴格按其規(guī)定進行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對，再依據(jù)自己的使用目的，加以選用，記錄其來源。2、培養(yǎng)基制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號，好終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等，記錄應(yīng)復(fù)制一份，原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成份稱量培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂，好好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側(cè)，每稱完一種成分即在配方上做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后，還應(yīng)進行一次檢查。培養(yǎng)基制備器各種工作模式預(yù)存五組分配參數(shù)。湖北瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

全自動培養(yǎng)基制備儀主要特點：水蒸氣高溫滅菌，保證整個制備過程在無菌下進行。湖北瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基配置原則：滅菌處理，要獲得微生物純培養(yǎng)，必須避免雜菌污染，因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言，更是要進行嚴格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌，一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2，121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中，長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖，因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2，112.6℃15-30分鐘進行滅菌，某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基，可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合；長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子（特別是鈣、鎂、鐵離子）結(jié)合形成難溶性復(fù)合物而產(chǎn)生沉淀。湖北瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器

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